結(jié)直腸癌中c-Met蛋白表達(dá)與血管生成關(guān)系的臨床實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、近年來，我國(guó)結(jié)直腸癌發(fā)病率呈快速上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著人們的生命健康。目前雖然治療手段多樣，但效果及預(yù)后欠佳。因此確定合理的治療靶點(diǎn)，制定更為完善的治療策略成為目前研究的熱點(diǎn)問題。近年來，對(duì)腫瘤組織微血管密度（Microvessel Density，MVD）的定量研究表明，MVD與腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有著顯著相關(guān)性。原癌基因(c-met)編碼的蛋白產(chǎn)物c-Met是肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(Hepatocyte Growth Factor，HGF)

2、的一個(gè)酪氨酸激酶受體，HGF/met信號(hào)系統(tǒng)有多種功能，能促進(jìn)腫瘤組織的微血管形成和腫瘤細(xì)胞的增殖與分裂，c-Met蛋白的異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切關(guān)系。結(jié)直腸癌組織中MVD與c-Met蛋白表達(dá)的相關(guān)性及其與臨床病理特征關(guān)系的研究文獻(xiàn)較少，本實(shí)驗(yàn)探討了結(jié)直腸癌組織中MVD值與c-Met蛋白表達(dá)的相關(guān)性及與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系。
　　 目的：檢測(cè)結(jié)直腸癌組織中c-Met蛋白表達(dá)情況并計(jì)數(shù)其MVD值，探討兩者之間的相互

3、關(guān)系，評(píng)價(jià)其與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系。
　　 方法：
　　 1.隨機(jī)選取河北承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科2009-2010年手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的結(jié)直腸癌標(biāo)本40例、癌旁組織及正常結(jié)直腸粘膜組織各40例。標(biāo)本離體30分鐘內(nèi)，一部分立即投入液氮后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存。另一部分經(jīng)10％的福爾馬林固定后，常規(guī)脫水，石蠟包埋。
　　 2.應(yīng)用Western blot法檢測(cè)c-Met蛋白在正常結(jié)直腸組織、癌旁組織及結(jié)直腸癌

4、組織中的表達(dá)差異并分析其與臨床病理特征的關(guān)系。
　　 3.應(yīng)用免疫組化Sp(Streptavidin peorxidase)法檢測(cè)正常結(jié)直腸組織、癌旁組織及結(jié)直腸癌組織中用單克隆抗體CD34標(biāo)記的微血管，并計(jì)數(shù)微血管密度(MVD)，探討其與結(jié)直腸癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。
　　 4.所有數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以-x±s表示，兩個(gè)獨(dú)立樣本組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，多組的組間比較用方差分析，p＜0.0

5、5表示差異有顯著性， p＞0.05為差異無顯著性。
　　 結(jié)果：
　　 1.c-Met蛋白在結(jié)直腸癌組織、癌旁組織及正常結(jié)直腸組織中的表達(dá)我們用Western-Blot法檢測(cè)40例結(jié)直腸癌組織、癌旁組織及正常結(jié)直腸組織中c-Met蛋白的表達(dá)量分別為4.12±0.87，2.53±0.47，0.82±0.21，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，c-Met蛋白在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)最高，在癌旁組織及正常結(jié)直腸組織中表達(dá)量依次降低，三者之間c-Met

6、蛋白表達(dá)情況的差異有顯著性(p＜0.01)；將結(jié)直腸癌組織分別按腫瘤的侵及深度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，分化程度和Dukes分期進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)c-Met蛋白在癌細(xì)胞侵及周圍軟組織的結(jié)直腸癌組織中表達(dá)高于未侵及周圍軟組織者(P＜0.05)；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌組織中表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者；Dukes(C+D)期的結(jié)直腸癌組織中c-Met蛋白表達(dá)高于Dukes(A+B)期，結(jié)果差異均有顯著性(p＜0.01)；c-Met蛋白隨著結(jié)直腸癌分

7、化程度的降低，其表達(dá)水平升高，差異有顯著性(p＜0.05)。c-Met蛋白在不同年齡、性別、腫瘤部位的結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2.結(jié)直腸癌組織、癌旁組織及正常結(jié)直腸組織中MVD的測(cè)定我們應(yīng)用免疫組化Sp(Streptavidin peorxidase)法檢測(cè)用單克隆抗體CD34標(biāo)記的血管，并計(jì)數(shù)微血管密度(MVD)。結(jié)直腸癌組織、癌旁組織及正常結(jié)直腸組織中的MVD值分別為33.85±8.68，30.00±7.8

8、1，12.80±4.09，結(jié)直腸癌組織中MVD值最高，在癌旁組織及正常結(jié)直腸組織中MVD值依次降低，三者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；將結(jié)直腸癌分別按腫瘤的侵及深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況和Dukes分期進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)MVD值在侵及周圍軟組織的結(jié)直腸癌組織中高于未侵及周圍軟組織者(p＜0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌組織中MVD值高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者；Dukes(C+D)期的結(jié)直腸癌組織中MVD值高于Dukes(A+B)期的結(jié)直腸癌組

9、織中的MVD值，差異有顯著性(p＜0.01)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，在不同年齡、性別、腫瘤部位及分化程度的結(jié)直腸癌組織中的MVD值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 3.結(jié)直腸癌組織中c-Met蛋白的表達(dá)與微血管密度的關(guān)系我們對(duì)結(jié)直腸癌組織中c-Met蛋白的表達(dá)情況與微血管密度值進(jìn)行相關(guān)性研究，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌中c-Met蛋白的表達(dá)水平與癌組織中微血管密度值有正相關(guān)性(R=0.618p＜0.01)。提示在結(jié)直腸癌組織中，隨著c-Met蛋白表

10、達(dá)水平的升高，微血管密度值也相應(yīng)升高。
　　 結(jié)論：
　　 1.c-Met蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平顯著高于癌旁組織及正常粘膜組織，c-Met蛋白的高表達(dá)與結(jié)直腸癌的臨床分期、浸潤(rùn)深度、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。
　　 2.結(jié)直腸癌組織中的MVD值高于癌旁組織及正常粘膜組織，且隨著結(jié)直腸癌的進(jìn)展，MVD值也呈增高趨勢(shì)，提示腫瘤組織血管高度增生為其侵襲和轉(zhuǎn)移提供了基礎(chǔ)。
　　 3.結(jié)直腸癌組織中c-