p38-HSP27信號通路介導ATP缺失時腎小管上皮細胞肌動蛋白細胞骨架重構作用的研究.pdf

1、以往的研究證實，缺血性腎損傷時腎小管上皮細胞肌動蛋白細胞骨架重構是導致腎功能受損加重的重要原因，但缺血性腎損傷時肌動蛋白細胞骨架重構的具體機制尚不清楚。本研究模擬腎臟的缺血狀態(tài)，在建立細胞體外ATP缺失模型的基礎上，研究ATP缺失時腎小管上皮細胞肌動蛋白細胞骨架重構情況及肌動蛋白細胞骨架重構的可能機制，以期為缺血性腎損傷的發(fā)病機制提供理論依據(jù)。根據(jù)既往的研究結果，我們推測p38-HSP27信號通路可能參與了ATP缺失時腎小管上皮細胞肌動

2、蛋白細胞骨架的重構過程。 本研究選用大鼠近端’腎小管上皮細胞系(NRK52E細胞)，用熒光染色法觀察ATP缺失后肌動蛋白細胞骨架的重構情況；用免疫印跡法研究細胞內(nèi)p38激酶的表達及活性的改變，同時分析HSP27的表達、磷酸化水平及其在細胞內(nèi)定位的改變。F-肌動蛋白熒光染色結果表明，ATP缺失后NRK52E細胞肌動蛋白細胞骨架明顯重構， F-肌動蛋白的含量顯著增高，并與ATP缺失處理時間相關。 該結果說明ATP缺失后肌動蛋

3、白細胞骨架發(fā)生了聚合的重構變化。蛋白免疫印跡結果表明，ATP缺失后p3 8激酶迅速激活，HSP27磷酸化顯著加強，且HSP27出現(xiàn)了從骨架成分到胞漿成分的重分布現(xiàn)象。運用p38激酶的抑制劑SB203580預處理細胞之后，p38激酶的活性得以明顯抑制，HSP27的磷酸化也被顯著抑制，HSP27的重分布現(xiàn)象也得以逆轉；同時ATP缺失所致的肌動蛋白細胞骨架重構現(xiàn)象得以部分逆轉，ATP缺失所致的F-肌動蛋白含量的增高也被顯著抑制。本研究結果表明