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文檔簡介
1、目的:探討不同轉(zhuǎn)移潛能的人鼻咽癌細胞株中BRMS1基因在mRNA和蛋白表達水平的差異,并為課題組下一步動物實驗提供細胞理論基礎。
方法:體外培養(yǎng)5株不同組織學類型及不同轉(zhuǎn)移習性的人鼻咽癌細胞株CNE-1、CNE-2Z、SUNE-1、SUNE-1-5-8F、SUNE-1-6-10B。1.應用實時熒光定量PCR法(real-time PCR)檢測5種人鼻咽癌細胞株中BRMS1基因mRNA的表達水平;2.免疫組化和Western b
2、lot兩種方法檢測5種人鼻咽癌細胞株中BRMS1蛋白的定性及定量表達水平。
結(jié)果:1.應用實時熒光定量PCR法檢測,發(fā)現(xiàn)不同轉(zhuǎn)移習性的人鼻咽癌細胞均擴增出BRMS1mRNA,且隨著細胞轉(zhuǎn)移習性增高,BRMS1mRNA表達水平逐漸降低(p<0.05);2.通過Western-blot技術檢測了BRMS1蛋白在人鼻咽癌細胞中的表達,結(jié)果顯示,BRMS1基因隨著細胞轉(zhuǎn)移習性增高,蛋白表達水平逐漸降低(p<0.05);3.通過免疫組織
3、化學方法檢測了 BRMS1在鼻咽癌細胞中的表達,結(jié)果表明BRMS1在鼻咽癌細胞膜和/或細胞質(zhì)中表達。
結(jié)論:1. BRMS1基因在不同人鼻咽癌細胞株中mRNA水平和蛋白水平均有表達且表達具有一致性,隨著BRMS1基因mRNA水平表達的增高,在蛋白水平表達也呈增高趨勢;2.BRMS1基因在mRNA水平隨鼻咽癌細胞株轉(zhuǎn)移潛能增高表達量下降;3.BRMSI基因在蛋白水平隨鼻咽癌細胞株轉(zhuǎn)移潛能增高表達量下降;4.BRMS1基因在低轉(zhuǎn)移
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