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文檔簡介
1、目的:檢測慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒引起的肝炎肝硬化、急性乙型肝炎患者和正常人外周血自然殺傷細胞(NK細胞)和活化NK細胞數(shù)量及HLA-Cw的基因分型,探討乙型肝炎外周血NK細胞和活化NK細胞數(shù)量的變化及其與HLA-Cw基因型的關系。 方法:(1)收集外周血標本:111例乙型肝炎病毒感染者(包括51例慢性乙型肝炎患者、30例乙肝肝硬化患者和30例急性乙型肝炎發(fā)病期患者)和41例健康對照,均來自山東地區(qū)漢族人群。(2)選擇51
2、例慢性乙型肝炎患者中符合干擾素治療指征的患者29例,分別給予聚乙二醇化干擾素-α抗病毒治療12周。收集治療前后外周血標本。(3)采用流式細胞術檢測NK細胞和活化NK細胞的數(shù)量,分析其差異及臨床意義。(4)通過序列特異性寡核苷酸分型(PCR-SSO)技術進行HLA-Cw的基因分型。 結果:(1)肝炎肝硬化組、慢性乙型肝炎組、正常對照組及急性肝炎組NK細胞的數(shù)量分別為13.22%±4.61%、14.36%±1.07%、19.03%±
3、4.91%、22.62%±3.70%。(2)肝炎肝硬化組、慢性乙型肝炎組、正常對照組及急性肝炎組活化NK細胞的數(shù)量分別為45.68%±14.64%、47.14%±5.67%、53.88%±14.0l%、65.2896±14.4596。(3)急性肝炎組的NK細胞和活化NK細胞的數(shù)量均較正常對照組增高(P<0.05),肝炎肝硬化組和慢性乙型肝炎組的NK細胞和活化NK細胞的數(shù)量均較正常對照組降低(P<0.05),且急性肝炎組與肝炎肝硬化組、慢
4、性乙型肝炎組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(4)慢性乙型肝炎應用聚乙二醇化干擾素-α抗病毒治療12周時,NK細胞和活化NK細胞的數(shù)量分別為15.77%±4.25%、46.9896±10.57%,與治療前比較,變化均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。(5)HLA-Cw*15在肝炎肝硬化組中基因頻率明顯高于正常對照組(x2=7.839,P<0.05),HLA-Cw*03在慢性乙型肝炎組中基因頻率明顯高于正常對照組(x2=5.216,P<0
5、.05),急性肝炎組與正常對照組間HLA-Cw位點各等位基因的基因型無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。(6)HLA-Cw*15在肝炎肝硬化組中基因頻率與活化NK細胞數(shù)量呈顯著負相關(Y=0.862,P<0.05),HLA=Cw*03在慢性乙型肝炎組中基因頻率與活化NK細胞數(shù)量呈顯著負相關(Y=-0.394,P<0.05)。 結論:(1)肝炎肝硬化和慢性乙型肝炎患者外周血NK細胞數(shù)量減少、功能減低,這些可能是導致其機體抗病毒免疫反應下
6、降、病毒持續(xù)感染的重要原因之一。(2)急性乙型肝炎患者NK細胞功能增高,可能在機體清除病毒過程中起作用。(3)慢性乙型肝炎組聚乙二醇化干擾素-α抗病毒治療12周前后,NK細胞和活化NK細胞的數(shù)量均無明顯變化,可能與干擾素-α應用時間短有關。(4)HLA-Cw*15基因型與肝炎肝硬化患者高風險相關,并可能通過影響NK細胞功能使病毒持續(xù)復制、肝炎反復活動而發(fā)展為肝硬化。(5)慢性乙型肝炎患者HLA-Cw*03基因型可能是通過影響NK細胞而導
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