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文檔簡介
1、目的:通過皮下注射異丙基腎上腺素(Isopreterenol,ISO)建立慢性心力衰竭Sprague—Dawley(SD)大鼠模型,檢測淫羊藿總黃酮(TotalFlavonesofEpimedium,TFE)對慢性心力衰竭大鼠左室重量指數(shù)、死亡率、心功能、左室心肌病理形態(tài)、神經(jīng)內(nèi)分泌細胞因子激活所產(chǎn)生的去甲腎上腺素、腫瘤壞死因子—α、一氧化氮及左室心肌組織環(huán)核苷酸(環(huán)磷酸腺苷、環(huán)磷酸鳥苷)改變的影響,探討淫羊藿總黃酮對慢性心力衰竭大鼠左
2、室重塑的干預(yù)作用及其機制。 方法:用異丙基腎上腺素(170mg·kg-1)對SD大鼠皮下注射2次,6周后依據(jù)超聲心動圖檢測左室短軸縮短率(FS)<45%確定心力衰竭造模成功,按照FS順序?qū)?8只大鼠隨機分為4組:淫羊藿總黃酮低劑量治療組(TFElow—dose,TFE—L)、淫羊藿總黃酮中劑量治療組(TFEmedium—dose,TFE—M)、淫羊藿總黃酮高劑量治療組(TFEhigh—dose,TFE—H)、模型(CHF)組。空
3、白對照(CON)組10只。18周后行血流動力學(xué)檢查,取心臟檢測左室重量指數(shù),用蘇木精—伊紅(HE)染色方法檢測左室心肌組織病理形態(tài)學(xué)改變,ELISA方法檢測大鼠血漿去甲腎上腺素濃度,放射免疫方法檢測大鼠血漿腫瘤壞死因子—α,硝酸還原酶法檢測大鼠左室心肌一氧化氮濃度,放射免疫方法檢測大鼠左室心肌組織環(huán)核苷酸(環(huán)磷酸腺苷、環(huán)磷酸鳥苷)濃度。 實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理。符合正態(tài)分布、方差齊性采用方差分析(
4、One—wayANOVA,LSD方法),病理評分結(jié)果比較采用非參數(shù)檢驗(Kruskal—WallisH檢驗,Mann—Whitney方法),大鼠死亡率比較采用卡方檢驗。以P<0.05為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果: 1.血流動力學(xué)檢測與對照組相比,模型組大鼠左室舒張末壓力顯著升高(P=0.000),左室內(nèi)壓峰值和左室壓力上升最大速率、左室壓力下降最大速率明顯降低(P=0.000),表明模型組大鼠心臟收縮、舒張功能明顯減弱
5、,存在著嚴重的心功能障礙,心力衰竭模型復(fù)制成功;與模型組相比,淫羊藿總黃酮各劑量組左室舒張末壓力顯著降低(P=0.000),左室壓力上升最大速率、左室壓力下降最大速率顯著增加(P=0.000),淫羊藿總黃酮高劑量組降低心率(P=0.000)、升高左室內(nèi)壓峰值(P=0.032)。 2.左室重量指數(shù)(LeftVentricularWeightIndex,LVWI)與對照組比較,模型組左室重量指數(shù)顯著增加(P=0.000),左室重塑明
6、顯;與模型組比較,淫羊藿總黃酮高劑量組左室重量指數(shù)明顯減低(P=0.002)。 3.左室心肌病理形態(tài)HE染色造模18周HE染色光鏡下示:對照組心肌細胞大小正常,排列整齊;模型組心肌細胞肥大,部分心肌細胞有嗜酸變性和/或壞死,病變呈灶性或彌散性分布,主要位于左心室壁,部分大鼠心肌間質(zhì)結(jié)締組織增生,增生的結(jié)締組織呈條索狀或斑塊狀;淫羊藿總黃酮高劑量組、淫羊藿總黃酮中劑量組病變較淫羊藿總黃酮低劑量組明顯減輕。 4.血漿去甲腎上
7、腺素(Noradrenalin)、腫瘤壞死因子—α(TumorNecrosisFactor—α)、左室心肌一氧化氮(NitricOxide)濃度模型組血漿去甲腎上腺素及腫瘤壞死因子—α顯著高于對照組(P=0.000),左室心肌一氧化氮濃度增高,差異無顯著性(P=0.142),證實該模型能很好地模擬慢性心力衰竭神經(jīng)內(nèi)分泌細胞因子激活的病理生理狀態(tài)。血漿去甲腎上腺素濃度,與模型組比較,淫羊藿總黃酮低劑量組、淫羊藿總黃酮中劑量組無顯著差異(P
8、=0.878,P=0.235),淫羊藿總黃酮高劑量組明顯降低(P=0.000),仍高于模型組(P=0.000),淫羊藿總黃酮各治療組比較,淫羊藿總黃酮低劑量組、淫羊藿總黃酮中劑量組無顯著差異(P=0.181),淫羊藿總黃酮高劑量組明顯降低(P=0.007)。血漿腫瘤壞死因子—α濃度,與模型組相比,淫羊藿總黃酮各劑量組均明顯降低血漿腫瘤壞死因子—α濃度(P=0.000),淫羊藿總黃酮高劑量組與對照組無顯著差異(P=0.160)。大鼠左室心
9、肌一氧化氮濃度,與模型組比較,淫羊藿總黃酮低劑量組有增高,無顯著性差異(P=0.472),淫羊藿總黃酮中劑量組、高劑量組明顯降低(P=0.004,P=0.024)。 5.左室心肌環(huán)核苷酸(環(huán)磷酸腺苷、環(huán)磷酸鳥苷)濃度模型組大鼠左室心肌環(huán)磷酸腺苷、環(huán)磷酸鳥苷均顯著降低(P=0.000),環(huán)磷酸腺苷/環(huán)磷酸鳥苷比值增加(P=0.004);與模型組組比較,淫羊藿總黃酮各劑量組大鼠左室心肌環(huán)磷酸腺苷濃度均增高(P=0.000,P=0.0
10、09,P=0.001)。與模型組比較,淫羊藿總黃酮低劑量、淫羊藿總黃酮中劑量組大鼠左室心肌環(huán)磷酸鳥苷濃度有增高,差異無顯著性(P=0.359,P=0.130),淫羊藿總黃酮高劑量組大鼠左室心肌環(huán)磷酸鳥苷濃度明顯增高(P=0.005),環(huán)磷酸腺苷/環(huán)磷酸鳥苷比值,與模型組組比較,淫羊藿總黃酮低劑量組、淫羊藿總黃酮中劑量組增高,差異無顯著性(P=0.058,P=0.881),淫羊藿總黃酮高劑量組降低,差異無顯著性(P=0.219),仍高于對
11、照組(P=0.073)。 6.大鼠死亡率模型組、淫羊藿總黃酮低劑量組、淫羊藿總黃酮中劑量組、淫羊藿總黃酮高劑量組大鼠死亡率分別為25.0%(3/12)、25.0%(3/12)、16.7%(2/12)、16.7%(2/12),對照組大鼠無死亡(0/10)。大鼠死亡率差異無顯著性(X2=3.101,v=4,P=0.541)。 結(jié)論: 1.淫羊藿總黃酮降低慢性心力衰竭大鼠的死亡率,改善大鼠心臟收縮、舒張功能障礙;
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