胃腸道腫瘤外周血轉(zhuǎn)移分子標志物篩選及CTNNB1、TGF αmRNA的差異表達.pdf

1、目的：篩選外周血與胃癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子標志物，并探討胃腸道腫瘤患者CTNNB1、TGFαmRNA的差異表達特征。 方法： 1、胃癌外周血轉(zhuǎn)移分子標志物的篩選隨機選取經(jīng)臨床與組織病理確診為胃癌的患者10例。其中5例發(fā)生轉(zhuǎn)移的病例作為胃癌合并轉(zhuǎn)移組，另5例作為胃癌未合并轉(zhuǎn)移組，按性別、年齡(±2歲)匹配5例健康志愿者，分別采集5ml血樣，每組隨機選取2例進行人全基因組表達譜檢測。檢測結(jié)果經(jīng)Panther system軟件篩選出

2、胃癌轉(zhuǎn)移相關(guān)差異表達基因。其余樣本用于后續(xù)實時熒光定量RT-PCR驗證芯片結(jié)果。 2、胃腸道腫瘤患者外周血CTNNB1、TGFαmRNA的差異表達隨機選取經(jīng)臨床與組織病理確診為胃腸道腫瘤的患者126例，采用問卷調(diào)查其生活行為相關(guān)資料。對照組選擇同期在該醫(yī)院健康體檢者65例。每位研究對象采集3ml血樣，應(yīng)用實時熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測CTNNB1、TGFαmRNA的差異表達。統(tǒng)計分析采用SPSS11.5軟件完成。 結(jié)果

3、： 1、芯片共篩出157個參與轉(zhuǎn)移的陽性基因，其中65個表達下調(diào)基因，92個表達上調(diào)基因。選擇顯著表達下調(diào)的CTNNB1和上調(diào)的TGFα基因進行實時熒光定量RT-PCR驗證得：TGFα基因表達與芯片結(jié)果吻合而CTNNB1基因未見明顯變化。 2、胃癌與腸癌患者之間及術(shù)前與術(shù)后患者之間外周血CTNNB1、TGFαmRNA表達無統(tǒng)計學差異；胃腸道腫瘤患者與健康對照之間外周血CTNNB1、TGFαmRNA表達亦無統(tǒng)計學差異；胃腸

4、道腫瘤合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或合并遠處轉(zhuǎn)移與否，其外周血CTNNB1、TGFαmRNA表達均無統(tǒng)計學差異。 3、胃腸道腫瘤外周血CTNNB1、TGFαmRNA表達呈明顯偏態(tài)分布。女性患者TGF-αmRNA表達高于男性(P<0.05)。50歲以下的患者外周血TGFαmRNA表達高于50歲以上的患者(P<0.05)。CTNNB1mRNA表達無性別、年齡差別。 4、以遠處轉(zhuǎn)移為因變量，進入多因素回歸方程的自變量為臨床分期(X1)，優(yōu)化

5、后的回歸方程為：Logit P=-22.084+5.537X1。 結(jié)論： 1、全基因組表達譜芯片共篩出157個陽性基因，其中65個下調(diào)基因，92個上調(diào)基因，為尋找新的胃癌轉(zhuǎn)移分子標志物提供了線索。 2、胃癌與腸癌患者之間以及胃腸道腫瘤合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠處轉(zhuǎn)移與否，其外周血CTNNB1、TGFαmRNA的表達差異均無統(tǒng)計學意義，提示上述指標不適合作為胃腸道腫瘤轉(zhuǎn)移標志物。 3、女性患者外周血TGFαmRNA