版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、 目的:(1)本研究旨在觀察單用或聯(lián)合YM155和TRAIL對人膀胱癌細胞體外增殖作用的影響,評估其誘導人膀胱癌細胞凋亡的作用。(2)為YM155基礎上的聯(lián)合用藥在膀胱癌治療中的臨床應用研究提供實驗依據(jù)和理論支持。
方法:分別單用不同濃度的YM155、TRAIL和5-Fu處理T-24細胞:YM155的各工作濃度分別為:1 、5、10、50、100、500、1000 nmol/L,TRAIL的各工作濃度分別為:1、3、10、
2、30、100、300、1000ng/ml,5-Fu的各工作濃度分別為:200、400、600、800和1000umol/ml,每種濃度設置4個復孔,空白對照組加入等體積的培養(yǎng)液,分別作用24,48和72小時。(2)聯(lián)合應用TRAIL和YM155,配制混合藥液中TRAIL的濃度分別為3、10、30、100、300ng/ml,而YM155的濃度均為5nmol/L,一組將混合藥液按上述方法加入培養(yǎng)孔,另一組相應加入等體積同濃度的TRAIL藥液
3、,每種濃度設置4個復孔,作用48小時。應用MTT法測定不同濃度的單一藥物、不同濃度的聯(lián)合藥物以及同一濃度的同一藥物作用不同時間后對T-24細胞生長的影響情況,繪制曲線,分析結果。(3)將生長狀態(tài)良好的細胞經(jīng)不同濃度的YM155藥液( 0、10、100、1000nmol/L)處理后,用RT-PCR和Western Blot方法檢測各組中的survivin mRNA和Survivin蛋白含量。(4)流式細胞儀測定YM155對膀胱癌細胞的細胞
4、凋亡率和細胞周期,以驗證其增強細胞毒性是激活細胞凋亡的特異機制。
結果:(1)單藥和聯(lián)合用藥后檢測不同濃度的不同藥物對T-24細胞生長的影響情況:不同濃度YM155作用24小時后能明顯抑制T-24細胞生長,50nmol/L濃度的藥物即可抑制近50%細胞生長,1000nmol/L作用最強,最大抑制率可達65%;48小時后抑制率較24小時有升高:10nmol/L的藥物即可抑制近45%細胞生長,500nmol/L時細胞生長抑制率可
5、達77.12.;72小時后其抑制率進一步升高,10nmol/L時抑制率達57.84%, 最高濃度時抑制率達到85%,相同作用時間內(nèi)隨藥物濃度不斷上升,各組T-24細胞生存率呈現(xiàn)明顯下降趨勢(P<0.01)。5nmol/L、10nmol/L、50nmol/L、100 nmol/L和1000 nmol/L5種濃度的YM155隨著作用時間的延長,T-24細胞生存率也呈現(xiàn)出明顯下降趨勢(P<0.05)。七種濃度的TRAIL對T-24作用24小時
6、和48小時后細胞的生存率改變均不明顯,所有濃度中最大抑制率不過20%,72小時后也只有1、300和1000ng/ml三種濃度處理后生長抑制率達到20%以上,最大達26.12%,1ng/ml和1000ng/ml的藥物隨作用時間的延長細胞生存率呈現(xiàn)明顯下降趨勢,且同一作用時間內(nèi)不同濃度梯度藥物之間細胞的生存率沒有明顯的差異(P>0.05);陽性對照組中五個濃度(200umol/ml、400 umol/ml、600 umol/ml、800 u
7、mol/ml和1000 umol/ml)的5-Fu分別對T-24細胞作用24小時后細胞的生長抑制率依次升高(P<0.05),最高達48%,48小時和72小時呈現(xiàn)出同樣的趨勢,最高抑制率分別達到31.18%和64.36%,400 umol/ml、600 umol/ml和1000umol/ml濃度組隨作用時間的延長,細胞的生長抑制率有明顯上升趨勢(P<0.05)。(2)5nmol/L YM155分別和TRAIL(3、10、30、100、30
8、0ng/ml)聯(lián)合處理48小時后細胞的生長抑制率不斷升高(P<0.05),最高達76.21%,而未聯(lián)合YM155時最高抑制率僅為21.02%,二者存在明顯的差異(P<0.01)。(3)分別用0、10、100、1000nmol/L 4種濃度的YM155處理T24細胞48小時后用RT-PCR技術檢測survivin的核酸含量結果顯示:隨藥物濃度的升高,細胞內(nèi)survivin的核酸含量不斷降低(P<0.05)。分別用0、10、100、1000
9、nmol/L 4種濃度的YM155處理T-24細胞48小時后用免疫印跡技術檢測Survivin的蛋白含量結果顯示隨藥物濃度的上升,不同細胞組中Survivin蛋白含量呈現(xiàn)明顯下降趨勢(P<0.05)。
結論:(1)YM155單獨作用可以顯著抑制膀胱癌細胞的生長,最佳作用濃度范圍為5-100nmol/L,該殺傷作用呈濃度依賴性和時間依賴性;(2)TRAIL單獨作用對T-24細胞的殺傷作用不明顯,即T-24細胞對TRAIL耐藥;
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- Survivin及其抑制劑YM155對角膜新生血管作用的研究.pdf
- Survivin對神經(jīng)母細胞瘤細胞生物學影響及其抑制劑YM155化療增敏作用研究.pdf
- Akt抑制劑魚藤素對膀胱癌T-24細胞生長的影響及機制的研究.pdf
- RNA干擾survivin和survivin小分子抑制劑YM155對食管鱗癌KYSE150細胞體內(nèi)外放射敏感性的實驗研究.pdf
- YM155在腫瘤細胞化療增敏中的作用及機制研究.pdf
- 谷氨酰胺酶抑制劑-968對細胞周期的影響及其與厄洛替尼的聯(lián)合用藥.pdf
- 血管生成抑制劑及聯(lián)合化療對胃癌生長抑制的研究.pdf
- Bcl-2抑制劑ABT-737與化療藥物聯(lián)合用藥的藥效學及機制研究.pdf
- 17-AAG和YM155單獨及聯(lián)合應用對食管鱗癌細胞株Te-1的影響.pdf
- IL-24聯(lián)合自噬抑制劑影響口腔鱗癌生長作用的研究.pdf
- PDE4抑制劑合用CTX對T24膀胱癌細胞形態(tài)學、增殖和侵襲的影響.pdf
- Ⅰ、環(huán)氧合酶-2抑制劑celecoxib與喜樹堿類衍生物聯(lián)合用藥的實驗研究;Ⅱ、新型血管生成抑制劑抗腫瘤作用及機制研究.pdf
- 氯化鈷對Walker256細胞HSP90的表達及其抑制劑17-AAG對細胞凋亡和生長影響.pdf
- mTOR抑制劑rapamycin聯(lián)合MEK抑制劑PD98059對胃癌細胞的協(xié)同作用與機制研究.pdf
- Src酪氨酸激酶抑制劑Ⅱ?qū)Π螂滓菩屑毎㏕24細胞的抑制作用及其抑制機理的研究.pdf
- 酪氨酸激酶抑制劑對T細胞功能影響的實驗研究.pdf
- siRNA干擾survivin基因聯(lián)合順鉑對SGC7901細胞生長影響的實驗研究.pdf
- RNA干涉抑制hTERT對人腦膠質(zhì)瘤細胞生長影響及機制研究.pdf
- 新型HSP90抑制劑SNX-2112與順鉑聯(lián)合用藥抑制慢性髓性白血病細胞K562作用的機制研究.pdf
- 5α-還原酶抑制劑與DU145細胞生長抑制劑的研究.pdf
評論
0/150
提交評論