X線照射對(duì)NADH脫氫酶活性和mtDNA復(fù)合物Ⅰ基因序列的影響.pdf

1、目的：
　　1探討不同劑量X線照射對(duì)人食管鱗癌Ec9706細(xì)胞NADH脫氫酶活性的影響。
　　2.分析6GyX線照射對(duì)線粒體DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)復(fù)合物I(ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5)6種基因序列的影響。
　　方法：
　　1.將人食管鱗癌細(xì)胞株EC9706進(jìn)行體外培養(yǎng)，分別用2Gy、4Gy、6Gy、8Gy五個(gè)劑量照射。照射之后提取線粒體并測(cè)定線粒體酶活性，選

2、取最佳劑量組。
　　2.用6GyX線照射Ec9706細(xì)胞后，提取mtDNA，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，純化PCR產(chǎn)物，并將PCR產(chǎn)物回收，純化。
　　3.對(duì)mtDNA的ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND56種基因進(jìn)行基因測(cè)序。
　　4.并用DNA序列分析軟件對(duì)ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5的變異情況進(jìn)行對(duì)比分析。
　　結(jié)果：
　　1.據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析:經(jīng)2Gy、4Gy、6Gy、8Gy不

3、同劑量照射后，各組之間NADH脫氫酶活性有顯著性差異(P＜0.05)，6Gy組NADH脫氫酶活性顯著低于其它四組(P＜0.01)。
　　2.經(jīng)6GyX線照射后，mtDNA的ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND56種基因序列沒(méi)有變化。
　　結(jié)論：
　　1.經(jīng)2Gy、4Gy、6Gy、8GyX線照射后，Ec9706細(xì)胞NADH脫氫酶活性都低于未照射組，從2Gy到6Gy，隨著劑量增加酶活性逐漸降低，在6Gy劑量時(shí)降到