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文檔簡介
1、在眾多微生物天然藥物中,核糖體多肽類藥物(RiPPs)是重要的一類。RiPPs是由核糖體合成,經(jīng)由翻譯后修飾而得到的一大類天然產(chǎn)物,具有非常廣泛的結(jié)構(gòu)多樣性和生物活性多樣性。這些多肽類藥物良好的抗菌活性及獨(dú)特的作用機(jī)制引起了廣泛關(guān)注,使這類化合物成為抗感染藥物研究的一個(gè)熱門的方向。在眾多核糖體多肽類藥物中,套索多肽相較于其它化學(xué)物,具有較為簡單的修飾。然而其獨(dú)特的“套索”狀結(jié)構(gòu)引起了眾多關(guān)注。這種獨(dú)特的三級結(jié)構(gòu)給套索多肽類藥物帶來了獨(dú)特
2、的穩(wěn)定性及抗菌活性。
本實(shí)驗(yàn)研究以腸桿菌為研究對象,挖掘探索新穎的套索多肽類抗生素。首先通過基因組挖掘的方法找到了來源于腸桿菌的套索多肽,通過結(jié)構(gòu)預(yù)測,這種套索多肽有可能是世界上最大的一個(gè)套索多肽,總共由多達(dá)24個(gè)氨基酸組成。將這種巨大套索多肽的基因簇克隆到pET41上,并在大腸桿菌宿主中表達(dá),經(jīng)過質(zhì)譜分析,成功得到可以產(chǎn)套索多肽化合物的重組菌,并確定最優(yōu)發(fā)酵條件,在37℃下培養(yǎng)5h后誘導(dǎo)三天,套索多肽化合物的產(chǎn)量最高。
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