Intermedin對低氧性肺動脈高壓大鼠的作用及與一氧化氮途徑的關(guān)系.pdf

1、目的:
　　 通過外源性給予新發(fā)現(xiàn)的小分子活性肽intermedin/adrenomedullin-2(IMD/ADM-2),研究其對肺動脈高壓和右心室肥大大鼠的防治作用,并探討其效應是否與一氧化氮系統(tǒng)有關(guān)。
　　 方法:
　　 1、SPF級標準雄性SD大鼠30只,體重180～200g,隨機分成3組,正常對照組(NC)、低02組(HH)與低O2加IMD/ADM-2組(HI)。將后兩組動物放入常壓低O2艙內(nèi)(8h/

2、d,6d/w,4weeks),艙內(nèi)O2濃度保持9％～11％,CO2<3％。其中,HI組在第一次進艙前在頸背部皮下植入含有IMD/ADM-2的微量滲透泵,劑量為5nmol/kg.d；NC組和HH組在頸背部皮下植入含有等容積生理鹽水的微量滲透泵。對照組大鼠除吸入空氣外,其他飼養(yǎng)條件與各低O2組相同。
　　 2、低氧4周后,①用戊巴比妥鈉(35mg/kg體重)腹腔麻醉,采用右心導管法測量肺動脈壓力,分別稱取右心室游離壁(RV)和左心室

3、加室間隔(LV+S)的重量,并計算出RV/(LV+S)的重量比,作為右室肥大的指標。保存血、肺動脈、肺組織樣本。②Masson三色染色測定肺細小動脈管壁面積/管總面積(WA/TA)、管腔面積/管總面積(CA/TA)及平均中膜厚度(PAMT)。③用硝酸還原法測定大鼠血漿及肺組織一氧化氮(NO)代謝產(chǎn)物的含量,化學比色法測定肺組織一氧化氮合酶(NOS)的活性。④將肺動脈離體孵育,用β液閃儀測定[3H]-L-Arg放射活性,計算組織攝取的L-

4、Arg的量。
　　 結(jié)果:
　　 ①與NC組相比,HH組的mPAP高45.70％(p<0.01),RV/(LV+S)高36.90％(p<0.01)；與HH組相比,HI組的mPAP低12.35％(p<0.01),RV/(LV+S)低9.09％(p<0.01)。而mCAP三組間無顯著性差異。②血漿NO代謝產(chǎn)物含量:與NC組相比,HH組低52.60％(p<0.01)；與HH組相比,HI組高38.04％(p<0.05)。③肺小血

5、管改建指標:與NC組相比,HH組的WA/TA明顯較高,PAMT明顯較高,而CA/TA明顯較低(p<0.01)；與HH組相比,HI組WA/TA明顯較低,PAMT明顯較低,而CA/TA明顯較高(p<0.01)。④肺組織NO代謝產(chǎn)物含量:與NC組相比,HH組低48.60％(p<0.05)；與HH組相比,HI組高59.70％(p<0.05)。⑤肺組織的NOS活性測定結(jié)果:與NC組比,HH組的誘導型NOS(iNOS)活性高29.90％(p<0.0

6、1),而結(jié)構(gòu)型NOS(cNOS)活性低47.50％(p<0.01)；與HH組比,HI組的iNOS活性低38.40％(p<0.01),cNOS活性高121.60％(p<0.01)。⑥L-Arg轉(zhuǎn)運:用0.5nmol/L[3H]-L-Arg孵育時,肺動脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運量,HH組比NC組低36.50％(p<0.05),HI組比HH組高69.30％(p<0.05)；用5nmol/L[3H]-L-Arg孵育時,肺動脈組織的[3H

7、]-L-Arg的轉(zhuǎn)運量,HH組比NC組低44.70％(p<0.01),HI組比HH組高101.20％(p<0.01)；用10nmol/L[3H]-L-Arg孵育時,肺動脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運量,HH組比NC組低31.30％(p<0.05),HI組比HH組高59.50％(p<0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 ①外源性給予IMD/ADM-2能明顯降低大鼠低氧性肺動脈高壓,改善右心室肥大,減輕由低氧引起的肺小血管改