橙皮苷衍生物的合成及其藥理作用的研究.pdf

1、橙皮苷是橙皮素的蕓香糖苷,為二氫黃酮衍生物,主要存在甜橙及其他柑橘屬的水果、葉和果皮中,橙皮苷具有廣譜的生物活性,能抗癌、抗病毒、抗氧化、抗過(guò)敏、抗炎、降血壓等。由于橙皮苷安全無(wú)毒副作用,以橙皮苷為先導(dǎo)化合物,通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾,開(kāi)發(fā)新的活性物質(zhì),這一直是科學(xué)界研究的熱點(diǎn)。本論文選擇基于受體的藥物設(shè)計(jì)方法,以ACE酶為受體,運(yùn)用分子對(duì)接,設(shè)計(jì)與ACE酶受體相匹配的橙皮苷衍生物配體,然后對(duì)配體進(jìn)行化學(xué)合成,開(kāi)展體外ACE酶

2、抑制活性的實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證分子對(duì)接的理論結(jié)果;同時(shí),根據(jù)橙皮苷先導(dǎo)化合物具有的其他藥理活性,還對(duì)橙皮苷衍生物開(kāi)展了其他活性方面的研究。具體工作如下:
　　 1.橙皮苷衍生物的合成及結(jié)構(gòu)表征
　　 以橙皮苷為先導(dǎo)化合物,通過(guò)酸水解和甲基化反應(yīng)分別制備橙皮素、甲基橙皮苷、甲基橙皮素中間體,然后通過(guò)醚化和酯化反應(yīng)得到橙皮素、甲基橙皮素的醚類及酯類物質(zhì),同時(shí)根據(jù)UV,IR,1H NMR,MS等圖譜對(duì)目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。
　

3、　 2.橙皮素-7-烷基醚的抗菌作用
　　 通過(guò)紙片法和二倍稀釋法研究橙皮素-7-烷基醚對(duì)5種微生物菌株的抑制作用,菌株主要是細(xì)菌(G+:金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌;G:大腸桿菌、變形桿菌)和真菌(白色念珠菌),結(jié)果表明,在藥物濃度在400μg/mL時(shí),橙皮素-7-烷基醚時(shí)白色念珠菌無(wú)抑制作用,但是對(duì)四種細(xì)菌具有顯著的抑制效果,抑菌圈平均直徑在1.5-3.9mm;與橙皮苷和橙皮素相比,橙皮素-7-烷基醚對(duì)細(xì)菌的抑制能力都是隨

4、著烷基碳鏈的延長(zhǎng)(Cn=12)而增強(qiáng),其中,橙皮素-7-正十二烷基醚對(duì)金黃色葡萄球菌表現(xiàn)出最大抑制作用(MlC=6.25μg/mL)。
　　 3.甲基橙皮素-7-烷基醚的抗氧化和抗炎作用
　　 通過(guò)觀察甲基橙皮素-7-烷基醚對(duì)體外超氧負(fù)離子自由基(O2·-)和羥自由基(OH·)的清除能力、對(duì)小鼠體內(nèi)巨噬細(xì)胞NO釋放的抑制作用、對(duì)氟氏佐荊誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎小鼠血清中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)濃度的影響,研究甲基橙

5、皮素-7-烷基醚的抗氧化能力。同時(shí)通過(guò)考察衍生物對(duì)氟氏佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎小鼠的足腫脹的抑制作用、對(duì)關(guān)節(jié)炎小鼠血清中COX-2、PGE2的影響和對(duì)醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)管通透性的影響,研究甲基橙皮素-7-烷基醚的抗炎作用,結(jié)果得出甲基橙皮素-7-正辛基醚具有較好的抗氧化和抗炎能力。
　　 4.甲基橙皮素-7-烷基醚對(duì)小鼠胃排空和小腸推進(jìn)的作用
　　 以小鼠胃內(nèi)殘留率和小腸推進(jìn)率為指標(biāo),研究甲基橙皮素-7-烷基醚對(duì)阿托品所致小鼠胃

6、排空和小腸推進(jìn)抑制的拮抗作用,結(jié)果表明甲基橙皮苷對(duì)小鼠胃內(nèi)殘留率為39.9％,對(duì)小腸推進(jìn)率為52.75％,拮抗作用顯著。
　　 5.橙皮苷衍生物對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的抑制作用
　　 以ACE酶為受體,將分子對(duì)接設(shè)計(jì)出的橙皮苷衍生物配體進(jìn)行合成確證,然后通過(guò)ACE酶抑制實(shí)驗(yàn),實(shí)際驗(yàn)證所合成化合物的抑制能力;同時(shí),對(duì)所合成化合物的結(jié)構(gòu)與降血壓活性之間也進(jìn)行了構(gòu)效關(guān)系的研究,結(jié)果表明,橙皮苷對(duì)ACE酶的抑制活性,通過(guò)計(jì)算機(jī)分子對(duì)

7、接技術(shù)預(yù)測(cè)評(píng)分得到的結(jié)果和實(shí)際測(cè)量的結(jié)果存在一定的誤差。在橙皮素-7-烷基醚類衍生物中,橙皮素-7-正十六烷基醚表現(xiàn)出最強(qiáng)的抑制活性,對(duì)ACE酶的抑制率為50.96％;而甲基橙皮素-7-烷基醚類衍生物中,甲基橙皮素-7-正十二烷基醚抑制活性最強(qiáng),抑制率為43.04％;在橙皮素7位醚類/酯類和甲基橙皮素7位醚類/酯類衍生物中,酯類化合物和引入含有苯基的醚類化合物對(duì)ACE酶的抑制率下降;甲基橙皮素-7-正丁基醚與甲基橙皮素-7-(1"-溴代