2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景和目的:
  血管纖維化表現(xiàn)為血管壁細胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)異常增多,過度沉積和基質(zhì)重塑,導致血管管徑縮小和/或管壁增厚,其發(fā)生機制是心血管領(lǐng)域面臨的重要課題之一,目前尚未完全闡明。人類尾加壓素II(Urotensin II,UII)是由11個氨基酸殘基組成的縮血管活性肽,具有廣泛的生物學效應,現(xiàn)已證明UII能夠強烈收縮動脈血管,促進血管平滑肌細胞和成纖維細胞增殖,促進細胞遷移,促進泡沫細

2、胞形成等等,我們課題組前期研究發(fā)現(xiàn),UII能夠促進血管外膜成纖維細胞表型轉(zhuǎn)化,并能夠激活Smad信號途徑,提示它是一種新的促進血管纖維化的縮血管活性肽,在血管纖維化中的作用和機制值得深入研究。另有報道,結(jié)締組織生長因子(Connective tissue growth factor,CTGF)是一種新發(fā)現(xiàn)的可刺激成纖維細胞增殖和膠原沉積的生長因子,能夠促進成纖維細胞細胞表型轉(zhuǎn)化、細胞增殖、遷移和細胞外基質(zhì)沉積等。然而,UII和CTGF在

3、血管纖維化中的關(guān)系尚未闡明。為此,本工作采用體外培養(yǎng)的大鼠胸主動脈外膜成纖維細胞,以論證UII可否通過激活Smad信號促進血管外膜成纖維細胞表達CTGF的假設(shè),從而探討血管纖維化和UII作用的新機制,為防治血管纖維化進展提供新的實驗依據(jù)。
  方法:
  1.原代培養(yǎng)雄性SD大鼠主動脈血管外膜成纖維細胞,實驗采用第3-5代細胞。待細胞乏血清同步化24小時后,分別用不同濃度的UII(10-10-10-7mol/l)刺激不同時間

4、,采用蛋白免疫印跡試驗(Western blot)測定細胞中CTGF的表達變化;明確UII刺激大鼠血管外膜成纖維細胞表達CTGF的濃度及時間曲線。
  2.采用RNA干擾技術(shù),分別使Smad2和Smad3基因沉默,再以10-9mol/lUII刺激血管外膜成纖維細胞24小時,采用Western blot來檢測血管外膜成纖維細胞中CTGF的表達情況。
  結(jié)果:
  1.UII以濃度依賴性方式刺激大鼠血管外膜成纖維細胞合成

5、CTGF。分別采用10-10-10-7mol/l的UII刺激大鼠血管外膜成纖維細胞24小時,結(jié)果發(fā)現(xiàn)CTGF表達呈濃度依賴性,其中10-9mol/l組表達量最高(P<0.01)。
  2.UII以時間依賴的方式刺激血管外膜成纖維細胞合成CTGF。采用10-9mol/lUII分別刺激大鼠血管外膜成纖維細胞0、3、6、12和24小時后,細胞中CTGF表達隨刺激時間延長而逐漸增加,至12小時表達量明顯增高,24小時進一步增加(P<0.0

6、5),表明UII能夠以時間依賴方式刺激外膜成纖維細胞表達CTGF。
  3.通過RNA干擾使Smad2和Smad3基因分別沉默,可以減弱UII誘導的大鼠血管外膜成纖維細胞表達CTGF,siRNA處理組均較UII組降低(P<0.01)。
  結(jié)論:
  本研究發(fā)現(xiàn)UII能夠以濃度和時間依賴的方式促進大鼠血管外膜成纖維細胞表達CTGF;Smad2和Smad3在介導UII促進大鼠血管外膜成纖維細胞表達CTGF中發(fā)揮了重要作用

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