紅霉素、四環(huán)素及左氧氟沙星單用及兩兩聯(lián)合時(shí)抗Uu活性的對(duì)比研究.pdf

1、研究背景： 由于Uu可以引起非淋球菌性尿道炎、不孕不育、圍產(chǎn)期感染等一系列疾病，而日益引起人們的重視。但相關(guān)抗生素對(duì)Uu的耐藥率卻越來(lái)越高。如何減少菌株耐藥性的產(chǎn)生已成為迫在眉睫的問(wèn)題。在細(xì)菌感染中，常有聯(lián)合使用抗生素，以提高治療的效果。在Uu感染時(shí)也有臨床大夫使用不同種抗生素聯(lián)合治療，但這都是臨床上的經(jīng)驗(yàn)用藥，是否真的能達(dá)到目的，能否真的降低抗生素的MIC，國(guó)內(nèi)外均無(wú)相關(guān)資料的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬在體外研究紅霉素、四環(huán)素及左氧沙星間

2、兩兩聯(lián)合作用于Uu時(shí)的MIC，并與單用時(shí)的MIC相比較，探討聯(lián)合用藥的可行性以及聯(lián)合方式，為臨床用藥提供理論依據(jù)。 研究目的： 研究紅霉素類的代表藥物紅霉素、四環(huán)素類的代表藥物四環(huán)素及喹諾酮類的代表藥物左氧沙星兩兩聯(lián)合與單用時(shí)對(duì)Uu MIC的改變情況，探討聯(lián)合用藥的可行性，為臨床用藥提供理論依據(jù)。 資料與方法： 1.標(biāo)本的收集菌株來(lái)自中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院性病實(shí)驗(yàn)室及黃埔院區(qū)性病實(shí)驗(yàn)室2007年2月～200

3、7年12月間的臨床標(biāo)本。臨床標(biāo)本經(jīng)液體培養(yǎng)并傳三代，再經(jīng)固體培養(yǎng)鑒定，在固體培養(yǎng)基中挑取菌落用液體培養(yǎng)再進(jìn)行純化，并進(jìn)行濃度測(cè)定，保存。共收集51株，其中女性標(biāo)本28例，男性標(biāo)本23例。年齡在18～65歲之間，平均28.5歲。所有患者均在取標(biāo)本前兩周內(nèi)未使用抗生素。 2.體外紅霉素、四環(huán)素及左氧氟沙星對(duì)Uu的MIC測(cè)定采用96孔板，用倍比稀釋法測(cè)定，觀察時(shí)間均為20小時(shí)。 3.紅霉素、四環(huán)素及左氧氟沙星兩兩聯(lián)合時(shí)對(duì)Uu

4、MIC的測(cè)定用微量液體平板棋盤(pán)法測(cè)定藥物聯(lián)用時(shí)的MIC。分別測(cè)定紅霉素+四環(huán)素、四環(huán)素+左氧沙星、紅霉素+左氧沙星時(shí)各自的MIC。沿?zé)o菌微孔板橫軸、縱軸加不同濃度兩種藥物各50 μl，然后加菌液100μl，觀察時(shí)間均為20小時(shí)。通過(guò)計(jì)算部分抑菌濃度指數(shù)(FIC)判斷相互作用，即：FIC=甲藥聯(lián)合時(shí)的MIC／甲藥單獨(dú)時(shí)的MIC+乙藥聯(lián)合時(shí)的MIC／乙藥單獨(dú)時(shí)的MIC，F(xiàn)IC≤0.5為協(xié)同作用，0.5

5、無(wú)關(guān)作用，F(xiàn)IC>2為拮抗作用。 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 4.1聯(lián)合用藥與單用時(shí)MIC值改變的比較：將MIC值轉(zhuǎn)換為對(duì)數(shù)后進(jìn)行t檢驗(yàn)，設(shè)顯著性水準(zhǔn)α=0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.2 MIC50、MIC90的計(jì)算：用百分位數(shù)法計(jì)算各組MIC50及MIC90。 4.3聯(lián)合用藥與單用藥時(shí)MIC50值改變的比較：采用非參數(shù)檢驗(yàn)(Wilcoxon檢驗(yàn))，對(duì)各組中位數(shù)進(jìn)行Z檢驗(yàn)，設(shè)顯著性水準(zhǔn)α=0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

6、 結(jié)果： 1.體外實(shí)驗(yàn)的51株臨床標(biāo)本中，紅霉素、四環(huán)素及左氧氟沙星的耐藥率分別為52.9％、23.5％、5.9％。 2.體外實(shí)驗(yàn)中，紅霉素、四環(huán)素及左氧氟沙星兩兩聯(lián)合作用于Uu時(shí)的MIC與單藥時(shí)比較：紅霉素和四環(huán)素聯(lián)合后，紅霉素及四環(huán)素的MIC下降均有顯著性差異(分別為：t=4.83，p<0.05；t=4.26，p<0.05)；紅霉素與左氧氟沙星聯(lián)用后，左氧氟沙星的MIC下降有顯著性差異(t=7.69.p<0.05

7、)，而紅霉素MIC升高且顯著性差異(t=5.54，p<0.05)；左氧氟沙星與四環(huán)素聯(lián)用后，左氧氟沙星及四環(huán)素的MIC較單藥時(shí)下降有顯著性差異(分別為：t=4.84，p<0.05；t=3.47，p<0.05)。 3.體外實(shí)驗(yàn)中，紅霉素與四環(huán)素、左氧氟沙星分別聯(lián)合作用于Uu紅霉素敏感株及耐藥株的情況：紅霉素與四環(huán)素聯(lián)合作用于紅霉素敏感株時(shí)，紅霉素的MIC改變沒(méi)有統(tǒng)計(jì)意義(t=1.556，p>0.05)；作用于耐藥株時(shí)，紅霉素的MI

8、C降低且有統(tǒng)計(jì)意義(t=7.24，p<0.05)。紅霉素與左氧氟沙星聯(lián)合作用于紅霉素敏感株時(shí)，紅霉素的MIC升高且有顯著性差異(t=3.60，p<0.05)；作用于耐藥株時(shí)，紅霉素的MIC下降且有顯著性差異(t=5.53，p<0.05)。 4.體外實(shí)驗(yàn)中，左氧氟沙星與紅霉素、四環(huán)素聯(lián)用作用于Uu左氧氟沙星敏感株及耐藥株時(shí)的情況：左氧氟沙星與四環(huán)素、紅霉素分別聯(lián)用作用于Uu左氧氟沙星敏感株時(shí)，左氧氟沙星的MIC較單藥時(shí)降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)

9、意義(分別為：t=4.29，p<0.05：t=7.32)。左氧氟沙星與四環(huán)素、紅霉素分別聯(lián)用作用于Uu左氧氟沙星耐藥株時(shí)，左氧氟沙星的MIC也較單藥時(shí)降低并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為：t=2.66，p<0.05；t=2.48，p<0.05)。 5.體外實(shí)驗(yàn)中，紅霉素、四環(huán)素及左氧氟沙星兩兩聯(lián)合作用于Uu時(shí)相互作用的情況：根據(jù)FIC值，紅霉素與四環(huán)素聯(lián)合時(shí)，作用表現(xiàn)為協(xié)同或相加的達(dá)66.7％；四環(huán)素與左氧沙星協(xié)同或相加為56.9％，但紅

10、霉素與左氧沙星協(xié)同或相加僅29.4％。此外，紅霉素與左氧氟沙星聯(lián)合作用于Uu左氧氟沙星敏感株組拮抗占51.3％；紅霉素與左氧氟沙星聯(lián)合治療解脲脲原體紅霉素敏感株組拮抗占66.7％；紅霉素與左氧氟沙星聯(lián)合作用于Uu紅霉素耐藥株組無(wú)關(guān)占54.2％；左氧氟沙星與四環(huán)素作用于Uu左氧氟沙星耐藥株組協(xié)同占50.0％；紅霉素與四環(huán)素聯(lián)合作用于Uu紅霉素耐藥株組協(xié)同占54.1％、相加占41.7％。 結(jié)論： 1.在臨床株中，紅霉素仍有較