基于納米顆粒的分子展示應用于超靈敏檢測.pdf

1、醫(yī)學檢驗技術(shù)在疾病預防與診斷中具有重要作用,而基于納米顆粒的功能性分子展示技術(shù)為醫(yī)學檢驗提供強大的技術(shù)手段,能夠?qū)崿F(xiàn)對低豐度檢測指標的檢驗。
　　目的:以乙型肝炎病毒(HBV)病毒樣納米顆粒和鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒為研究對象,將檢測相關(guān)的功能性分子分別展示在這兩種納米顆粒上,構(gòu)建出可用于超靈敏檢測的功能性納米顆粒復合結(jié)構(gòu);并將其應用到Ⅰ型人類免疫缺陷病毒(HIV-1)的P24抗原蛋白的分子檢測,實現(xiàn)對其的高靈敏度檢測。
　　

2、方法:主要采用分子生物學的手段,將能夠與抗體廣譜性結(jié)合的金黃色葡萄球菌Protein G(SPG)展示在 HBV病毒樣納米顆粒上,構(gòu)建出具有抗體廣譜性結(jié)合能力的HBV病毒樣納米顆粒復合體,并將其應用到HIV-1的P24抗原蛋白酶連免疫吸附分析(ELISA)檢測中,檢驗其相對的檢測靈敏度;將生物素結(jié)合肽(BAP)展示在鐵蛋白籠形結(jié)構(gòu)納米顆粒上,并經(jīng)生物素化,構(gòu)建出具有鏈霉親和素特異性結(jié)合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復合體,并將其應用到HIV-

3、1的P24抗原蛋白的ELISA檢測中,檢驗其相對的檢測靈敏度。
　　結(jié)果:成功的構(gòu)建出具有抗體廣譜性結(jié)合能力的HBV病毒樣納米顆粒復合體,并將其應用到HIV-1的P24抗原檢測中,其檢測下限能夠達到1ng/mL,較商業(yè)HIV-1 P24 ELISA試劑盒檢測下限10ng/mL,檢測靈敏度具有顯著提高;成功的構(gòu)建出具有鏈霉親和素特異性結(jié)合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復合體,并將其應用到HIV-1的P24抗原檢測中,其檢測下限能夠達到1n