烏司他丁治療百草枯所致急性肺損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景: 百草枯（1，1’—二甲基—4，4’—聯(lián)吡啶陽離子鹽）又名對草快，克無蹤，1955年英國人發(fā)現(xiàn)了其除草活性，并作為除草劑獲得登記。由于百草枯具有優(yōu)良的除草效果，而在世界上120多個(gè)國家廣泛使用，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中起著重要的作用。從七十年代初，研究發(fā)現(xiàn)百草枯對人類和動(dòng)物具有較強(qiáng)的毒性，且沒有特效的解毒劑，一旦發(fā)生誤服等事故時(shí)具有很大危險(xiǎn)性。而且證明百草枯是高穩(wěn)定性物質(zhì)，在土壤中的半衰期很長，容易被土壤中的有機(jī)物和粘土吸附。因此，隨

2、著百草枯的大量使用，殘留在環(huán)境和食品物料中的百草枯必將對人類和環(huán)境造成極大的影響。百草枯中毒早期可造成急性肺損傷（ALI）或急性呼吸窘迫綜合征（ARDS），患者多死于多臟器功能衰竭或呼吸衰竭，其發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚。目前尚無理想的治療方法。 現(xiàn)在研究認(rèn)為在ALI/ARDS發(fā)生過程中，中性粒細(xì)胞是主要炎癥細(xì)胞。中性粒細(xì)胞.內(nèi)皮細(xì)胞黏附，在肺組織積聚和釋放氧自由基、各種蛋白酶是造成ALI/ARDS的重要原因，因此拮抗這些毒性介質(zhì)將能

3、夠?qū)C(jī)體提供最直接的保護(hù)。烏司他丁是一種廣譜蛋白酶抑制劑，具有穩(wěn)定溶酶體膜、抑制粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性、纖維蛋白分解、IL—6，IL—8和清除氧自由基的作用。 目的: 通過建立百草枯中毒急性肺損傷大鼠模型，探討烏司他?。╱linastatin，UTI）對百草枯（paraquat，PQ）致急性肺損傷（ALI）的保護(hù)作用及可能機(jī)制。 材料與方法: 1.動(dòng)物分組與給藥 健康Wister大鼠45只，雌雄不限

4、，體重240～260g，隨機(jī)分為生理鹽水對照組（5只）、百草枯致急性肺損傷組（20只）、烏司他丁治療組（20只），每組取8h、24h、48h、72h共4個(gè)觀察點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只。①生理鹽水對照組組（NS組，n=5）：腹腔注入生理鹽水；②百草枯致急性肺損傷組（PQ組，n=20）：給予含百草枯（30mg/kg）的溶液經(jīng)胃管注入；③烏司他丁治療組（UTI組，n=20）；百草枯染毒后30分鐘腹腔注入含烏司他?。?00000u/kg）的等容量生理

5、鹽水。每組取8h、24h、48h、72h共4個(gè)觀察點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只。 2.標(biāo)本檢測 麻醉大鼠后，自心臟靜脈竇處取靜脈血，剪取右側(cè)肺組織后進(jìn)行左肺支氣管肺泡灌洗，收集支氣管—肺泡灌洗液（BALF）測定BALF中蛋白含量；測定肺組織濕/干重比（W/D）；血液及BALF中丙二醛（MDA）的含量、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH—Px）和超氧化物歧化酶（SOD）活性；右側(cè)肺組織行光鏡形態(tài)學(xué)觀察。 3.統(tǒng)計(jì)方法 本實(shí)驗(yàn)

6、所有的數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行完全隨機(jī)設(shè)計(jì)方差分析，結(jié)果用x±s表示。以P<0.05表示有顯著性差異。 結(jié)果: 1.肺濕/干重比（W/D）的比較：在對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)PQ中毒組較對照組肺（W/D）明顯增加，差異有顯著性（P<0.01）；UTI治療組較對照組肺（W/D）增加，差異有顯著性（P<0.05）；UTI治療組與PQ中毒組比較，肺（W/D）明顯降低（P<0.01）。 2.BALF中蛋白含量的變化：染毒

7、后BALF中蛋白含量增高，PQ中毒組、UTI治療組與NS組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)值比較均有顯著性差異（P<0.01）。UTI治療組比PQ中毒組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)值明顯降低（P<0.01）。 3.血漿及BALF中WBC計(jì)數(shù)及PMN百分比的變化：PQ組與UTI組血漿及BALF中WBC總數(shù)及PMN百分比逐漸升高，在各相應(yīng)時(shí)間與NS組比較明顯增高（P<0.01）。UTI組與PQ組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)值比較，WBC總數(shù)及PMN百分比下降（P<0.05）。

8、 4.血漿及BALF中GSH—Px，SOD，MDA的變化 4.1 PQ中毒組與對照組比較：中毒組血漿和BALF中MDA含量顯著高于對照組，差異有顯著性（P<0.01）；血漿SOD活力GSH—Px均下降，差異有顯著性（P<0.01）；BALF中SOD、GSH—Px活力均下降，但48h后SOD升高，差異有顯著性（P<0.01）。 4.2 UTI治療組與PQ中毒組比較：給予UTI治療后的治療組與中毒組比較，血漿中MDA含量明顯

9、下降（P<0.01），BALF中MDA含量下降（P<0.05）；GSH—Px和SOD活力升高，差異有顯著性（P<0.01）. 結(jié)論: 1.一次灌胃注入PQ引起大鼠急性肺損傷，血漿及BALF中MDA含量升高，SOD、GSH—Px活力下降，說明大量氧自由基的產(chǎn)生導(dǎo)致的氧化—抗氧化失衡是造成PQ中毒引起急性肺損傷的原因。 2.在一次灌胃注入PQ引起大鼠急性肺損傷的病理過程中，早期就出現(xiàn)肺泡腔內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤，血漿與BAL