小鼠模型制備HIV高滴度中和多抗免疫方案探索研究.pdf

1、艾滋病(AIDS)是以全身免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p害為特征的傳染性疾病，感染者終身攜帶人類免疫缺陷病毒(HIV)。迄今對(duì)該病仍無有效治療手段，多數(shù)感染者在數(shù)年潛伏期后發(fā)病，最終死于感染或者腫瘤。自1983年首次報(bào)道HIV以來，HIV以驚人的速度在全球蔓延，嚴(yán)重危害人類健康，因此研制安全有效的HIV疫苗和抗HIV藥物對(duì)于預(yù)防和控制HIV疫情具有十分重要的意義。研究者經(jīng)過大量嘗試，至今在保護(hù)性疫苗及抗HIV藥物上無實(shí)質(zhì)性進(jìn)展。
　　 近幾年，

2、一些廣譜中和抗體和相應(yīng)抗原表位的闡明，以及利用這些抗原表位進(jìn)行疫苗設(shè)計(jì)的嘗試等所取得的顯著成就，揭示對(duì)廣譜中和單抗的研究具有重要意義。基于中心成熟的單克隆抗體技術(shù)平臺(tái)，本研究利用小鼠模型，探究制備高滴度HIV中和多抗的方法，為相應(yīng)廣譜中和單抗的篩選奠定良好基礎(chǔ)，進(jìn)而為HIV疫苗的研發(fā)及HIV治療性抗體研制提供科學(xué)依據(jù)。
　　 本研究，結(jié)合Tzm-b1細(xì)胞中和實(shí)驗(yàn)及酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)初步建立了一套小鼠體液免疫評(píng)價(jià)體系。在此基礎(chǔ)上，利

3、用不同的免疫原，包括不同亞型的病毒、蛋白、質(zhì)粒、感染或轉(zhuǎn)染不同病毒的細(xì)胞等，結(jié)合佐劑，周期，位點(diǎn)，劑量等，通過單因素或多因素的改變，設(shè)計(jì)不同免疫方案，探究在不同品系、不同年齡層小鼠體內(nèi)引起的免疫反應(yīng)。通過對(duì)小鼠多抗監(jiān)測(cè)結(jié)果及細(xì)胞融合陽性率結(jié)果的分析，綜合評(píng)價(jià)免疫方案的有效性，探索制備高滴度HIV中和多抗的免疫方案。
　　 在研究過程中，通過對(duì)蛋白、質(zhì)粒、病毒和相關(guān)細(xì)胞免疫初步摸索，確立以滅活的NL4-3病毒為主要免疫原;在此基礎(chǔ)