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文檔簡介
1、目的:
探討腺病毒感染對CSE(cigarette smoke extract,香煙煙霧提取物)腹腔注射肺氣腫小鼠肺功能、肺病理、肺部炎癥、蛋白酶、凋亡及增殖的影響。
方法:
36只SPF級BALB/c小鼠隨機分為PBS組、CSE組和CSE+Adenovirus組,每組12只,制備CSE。各組分別在第1、11、22天注射PBS或CSE,第15天氣管內(nèi)滴注PBS或腺病毒,第28天處理各組小鼠。病毒處理后第7天
2、(造模第22天)每組隨機選取2只小鼠制備肺組織冰凍切片觀察RFP熒光;小動物肺功能檢測系統(tǒng)檢測肺功能;HE染色觀察肺部病理形態(tài)學(xué)改變,測定平均內(nèi)襯間隔(MLI)、肺泡破壞指數(shù)(DI)和平均肺泡隔厚度(MAST),行氣道和血管炎癥半定量評分;免疫組化法檢測肺組織MMP-2和MMP-9表達;TUNEL法檢測肺組織凋亡并計算凋亡指數(shù)(AI);免疫組化法檢測增殖標(biāo)志物Ki67表達,反映肺組織增殖情況,并計算增殖指數(shù)(PI)。
結(jié)果:<
3、br> (1) CSE+Adenovirus組肺組織可見紅色熒光,PBS組和CSE組均未觀察到紅色熒光。
(2)肺功能:與PBS組比較,CSE組與CSE+Adenovirus組小鼠肺阻力(RAW)增高,動態(tài)肺順應(yīng)性(Cdyn)降低,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。與CSE組比較,CSE+Adenovirus組RAW及Cdyn無明顯差異(p>0.05)。各組間小鼠呼吸頻率、潮氣量、每分鐘通氣量、呼氣時間、吸呼比差異均無統(tǒng)
4、計學(xué)意義(p>0.05)。
(3)肺病理:與PBS組比較,CSE組及CSE+ Adenovirus組肺泡破壞更重,MLI和DI增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),MAST降低,差異亦具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。與CSE組比較,CSE+ Adenovirus組肺泡破壞程度無明顯區(qū)別,MLI、DI及MAST均無明顯區(qū)別,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。
(4)氣道及血管炎癥:CSE+ Adenovirus組氣道
5、管壁周圍可見大量炎癥細胞浸潤,氣道炎癥半定量評分示,與PBS組比較,CSE組評分均值稍高于PBS組,但無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05),CSE+ Adenovirus組評分顯著增高,有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);與CSE組比較,CSE+Adenovirus組氣道炎癥評分也顯著增高,有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。CSE+ Adenovirus組血管管壁周圍可見炎癥細胞浸潤,血管炎癥半定量分析顯示,與PBS組比較,CSE組血管炎癥評分無統(tǒng)計學(xué)差
6、異(p>0.05),CSE+ Adenovirus組血管炎癥評分顯著增高,有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);與CSE組比較,CSE+ Adenovirus組血管炎癥評分顯著增高,有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
(5) MMP-2及MMP-9表達:與PBS組比較,CSE組和CSE+Adenovirus組MMP-2和MMP-9表達均增高,有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);與CSE組比較,CSE+ Adenovirus組該兩組蛋白表達亦增高
7、,有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
(6)凋亡:與PBS組比較,CSE組與CSE+Adenovirus組DI增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);與CSE組比較,CSE+Adenovirus組DI顯著增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
(7)增殖:與PBS組比較,CSE組與CSE+Adenovirus組肺組織Ki67表達增多,PI增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。與CSE組比較,CSE+Adenoviru
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