載脂蛋白E模擬肽對(duì)膿毒血癥小鼠肝臟LPS代謝相關(guān)受體表達(dá)的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、研究目的：
　　1、觀察載脂蛋白E(ApoE)模擬肽ApoE23對(duì)膿毒血癥小鼠血漿LPS濃度變化的影響。
　　2、研究ApoE23對(duì)膿毒血癥小鼠肝臟LPS代謝相關(guān)受體表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。
　　研究方法：
　　1、ApoE23合成采用固相合成法，高效液相色譜(HPLC)技術(shù)進(jìn)行純化;采用B組鼠傷寒沙門菌誘導(dǎo)膿毒血癥C57BL小鼠模型;實(shí)驗(yàn)小鼠分三組:(1)感染對(duì)照組;(2)膿毒血癥組;(3) ApoE23治療組。

2、>　　2、不同組小鼠血漿LPS（磷酸脂多糖）濃度測(cè)定采用連續(xù)透射免疫比濁法。
　　3、采用定量RT-PCR技術(shù)及Western-Blot技術(shù)檢測(cè)不同組別小鼠肝臟中低密度脂蛋白受體(LDLR)、低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白(LRP)、多配體蛋白聚糖-1(SDC1)、清道夫受體B1(SRB1)及ApoEmRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化。
　　研究結(jié)果：
　　1、膿毒血癥組小鼠腹腔注射B組鼠傷寒沙門菌后1h血液細(xì)菌培養(yǎng)即分離到B組

3、鼠傷寒沙門氏菌，小鼠肝臟病理切片表現(xiàn)為不同程度的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。血漿LPS濃度測(cè)定發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌腹腔注射后1h，小鼠血漿中LPS濃度已開始升高，3h、24h維持在較高水平。ApoE23治療后小鼠肝臟炎癥病變明顯減輕，血漿LPS濃度也明顯低于膿毒血癥組。
　　2、與感染對(duì)照組相比，膿毒血癥組小鼠肝臟LDLR、LRP、SDC1在mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平均有不同程度的降低，而SRB1變現(xiàn)為不同程度的升高;與膿毒血癥組相比，ApoE23治療后，

4、肝臟LDLR在1、3、24h的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平均升高;LRP在mRNA表達(dá)水平?jīng)]有改變，1h和3h蛋白質(zhì)表達(dá)水平升高;SDC1與SRB1在1h的mRNA表達(dá)水平表現(xiàn)為一過性變化。
　　3、與感染對(duì)照組相比，膿毒血癥組小鼠肝臟ApoE在1h、3h的mRNA和蛋白質(zhì)水平表達(dá)下降; ApoE23治療后，與膿毒血癥組相比，ApoE在mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平均沒有明顯改變。
　　結(jié)論：
　　1、ApoE23能夠明顯改善膿

5、毒血癥小鼠肝臟組織炎癥侵潤(rùn)，并明顯降低膿毒血癥小鼠血漿中LPS濃度，發(fā)揮抗膿毒血癥效應(yīng)。
　　2、膿毒血癥時(shí)肝臟LPS代謝相關(guān)受體表達(dá)下降，導(dǎo)致LPS在肝臟中代謝障礙，上述病理生理變化加重血漿LPS濃度的升高。ApoE23治療促進(jìn)肝臟LDLR、 LRP表達(dá)水平回升，加速LPS在肝臟中的代謝，發(fā)揮抗膿毒血癥效應(yīng)。
　　3、ApoE對(duì)膿毒血癥的治療作用目前仍存在爭(zhēng)議，ApoE缺陷或是濃度過高均有可能誘發(fā)膿毒血癥，所以膿毒血癥時(shí)保