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1、本文研究目的:通過(guò)檢測(cè)各亞型HLA-G在正常妊娠及重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中的表達(dá),探討HLA-G在子癇前期發(fā)病及其病理生理過(guò)程中的作用。 研究方法: 1.采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR(Real-timeRT-PCR)方法,以β-actin為內(nèi)參照,應(yīng)用TaqMan探針?lè)ǚ謩e定量檢測(cè)15例重度子癇前期患者(實(shí)驗(yàn)組)及15例正常妊娠胎盤(pán)組織(對(duì)照組)中HLA-GmRNA的水平; 2.應(yīng)用SYBRGreenⅠ實(shí)時(shí)熒光
2、定量RT-PCR分別定量檢測(cè)10例實(shí)驗(yàn)組胎盤(pán)及10例對(duì)照組胎盤(pán)中HLA-G各個(gè)亞型mRNA的水平; 3.采用Western印跡分別檢測(cè)10例實(shí)驗(yàn)組及10例正常對(duì)照組胎盤(pán)組織中HLA-G各亞型蛋白表達(dá)差異。 研究結(jié)果: 1.實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示,重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中HLA-GmRNA的水平較正常妊娠組降低約6.2倍,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2.SYBRGreenⅠ實(shí)時(shí)熒
3、光定量RT-PCR顯示與對(duì)照組相比,重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中總HLA-GmRNA顯著降低,以HLA-G1、HLA-G3降低為主。兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3.分析Western印跡的結(jié)果發(fā)現(xiàn),重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中HLA-G1、5蛋白印跡條帶灰度值與相應(yīng)的β-actin條帶的灰度值比率為0.63±0.07,明顯低于對(duì)照組的1.31±0.15;實(shí)驗(yàn)組HLA-G3蛋白印跡條帶灰度值與相應(yīng)的β-actin條帶的
4、灰度值比率為0.40±0.06,明顯低于對(duì)照組的0.68±0.05。可見(jiàn),重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中HLA-G的蛋白水平明顯低于正常妊娠。兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 研究結(jié)論: 1.重度子癇前期胎盤(pán)組織HLA-G的表達(dá)明顯下降,以膜結(jié)合型HLA-G1、HLA-G3亞型降低為主,這一異??赡軈⑴c了子癇前期的發(fā)生和病理生理過(guò)程。 2.本研究雖未檢測(cè)到子癇前期可溶性HLA-G水平的差異,而以往研究則發(fā)現(xiàn)
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