基于熱力學表達的黃連炮制與配伍變化的生物活性差異及化學表征研究.pdf

1、中藥藥性理論是中藥研究與應用的基礎，也是當今中醫(yī)藥研究的熱點和難點之一。作為可表征中藥生物活性之一的藥性理論是中藥的基礎與核心，傳統(tǒng)炮制和復方配伍可不同程度地改變中藥藥性，從而改變中藥的生物活性，這也是中醫(yī)用藥的兩大特色。為了客觀地評價中藥炮制和配伍對中藥活性/藥性的改變，探明其作用機理及其可能的物質基礎，本論文以臨床常用、在藥性表達上有代表性意義的中藥黃連炮制品及其配伍類方為研究對象，應用生物熱力學方法，并結合常規(guī)藥理和化學分析法，對

2、黃連炮制與配伍變化的生物活性差異及化學表征進行了較系統(tǒng)的研究。主要研究結果如下： 1.采用生物熱力學方法，定性定量地刻畫了黃連、黃連不同炮制品(醋制黃連、膽汁制黃連、鹽制黃連、吳萸黃連、姜制黃連、酒制黃連)及其與吳茱萸配伍系列經(jīng)典方(左金丸、甘露散、茱萸丸、反左金丸)對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及痢疾桿菌等微生物生長代謝的作用。研究結果表明：黃連不同炮制品和不同配伍復方，寒熱藥性不同，其作用于細菌生長代謝的熱譜及熱動力學參數(shù)有不同

3、程度的改變，具體表現(xiàn)為細菌在寒涼藥作用下的生長速率常數(shù)κ減小，且代謝產(chǎn)熱量Q也趨于下降，這與傳統(tǒng)中醫(yī)對方藥的賦性基本吻合。此外，首次用生物熱力學方法研究了黃連的主要活性部位--生物堿成分的的抑菌活性，結果顯示，小檗堿的抑制活性最強。 2.采用常規(guī)藥理實驗方法，分別考察了黃連不同炮制品和不同配伍類方的抑菌和解熱作用及其差異。常規(guī)藥理試驗也支持了生物熱力學法試驗所得結果，提示生物熱力學法可作為抗菌活性篩選方法之一。 3.采用

4、高效液相色譜法，同時測定了黃連不同炮制品中小檗堿、巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿五種生物堿成分的含量；還同時測定了黃連與吳茱萸配伍系列經(jīng)典類方中小檗堿、巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿及吳茱萸次堿的含量；最后，分別建立了黃連不同炮制品和不同配伍類方的HPLC指紋圖譜。 4.采用多元統(tǒng)計分析方法，綜合分析了黃連不同炮制品和不同配伍經(jīng)典方的生物熱譜圖與常規(guī)藥理活性、化學組分之間的相關性，結果表明：黃連不同樣品作用于細菌的熱力學結果

5、與常規(guī)藥理實驗得到的最小抑菌濃度(MIC)相關性非常顯著，相關系數(shù)所對應的P值小于0.0001；黃連不同炮制品作用于細菌的熱動力學參數(shù)與其所含的的小檗堿、巴馬汀及黃連堿的含量典型相關；而黃連與吳茱萸配伍系列經(jīng)典類方作用于細菌的熱動力學參數(shù)與其所含的小檗堿和藥根堿的含量典型相關，這可能是黃連經(jīng)炮制與配伍后，體現(xiàn)其生物活性差異的主要物質基礎之所在。提示生物熱力學方法可作為評價中藥活性/藥性的新的有效手段，且該方法具有普適性好、實時、在線、微