大豆異黃酮等復(fù)合抗氧化劑對(duì)2型糖尿病大鼠胰島細(xì)胞凋亡的干預(yù)機(jī)理研究.pdf

1、目的：通過體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法，探討大豆異黃酮(SIF)與維生素C(VitC)、維生素E(VitE)的協(xié)同作用對(duì)2型糖尿病(T2DM)致大鼠胰腺細(xì)胞凋亡的干預(yù)機(jī)理。 方法：取SPF級(jí)SD雄性大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，給予高脂飲食后腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。動(dòng)物共4組。(1)普食對(duì)照組：普通飲食喂養(yǎng)，以消毒的自來水灌胃干預(yù)。(2)糖尿病對(duì)照組：高脂飼料喂養(yǎng)，注射STZ成模后以消毒的自來水灌胃干預(yù)。(3)治療1組[

2、SIF+VitC+VitE(250mg+30mg+40IU/kg．d)劑量組]：高脂飼料喂養(yǎng)，注射STZ成模后給予SIF+VitC+VitE灌胃干預(yù)。(4)治療2組[SIF+VitC+VitE(50mg+10mg+20IU/kg．d)劑量組]：高脂飼料喂養(yǎng)，注射STZ成模后給予SIF+VitC+VitE灌胃干預(yù)。每組6只大鼠。灌喂干預(yù)4周。大鼠實(shí)驗(yàn)前采血檢測空腹血糖(FBG)、空腹血清胰島素(FINS)，血甘油三酯(TG)和總膽固醇(T

3、C)。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物終止實(shí)驗(yàn)后，即處死大鼠，取血清和胰腺組織，檢測以下指標(biāo)：制作光鏡病理切片做HE染色，觀察胰腺組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)；TUNEL法觀察胰島細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化及細(xì)胞凋亡率；免疫組織化學(xué)法檢測凋亡因子Fas在胰島中的表達(dá)情況；檢測超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)的含量；檢測血清中TNF—α、IFN—γ的含量。 結(jié)果： (1)糖尿病有誘導(dǎo)胰島細(xì)胞凋亡的作用。

4、 (2)糖尿病抑制SOD的活力和GSH的活性，促進(jìn)MDA、NO的產(chǎn)生，與普食對(duì)照組相比較差異極其顯著(p<0.05);SIF+VitC+VitE能改善糖尿病引起上述指標(biāo)的異常，與糖尿病對(duì)照組相比較，具有顯著性差異(p＜0.05)， (3)糖尿病時(shí)大鼠血清中的TNF—α，IFN—γ等促凋亡因子增加，與正常對(duì)照組大鼠血清中TNF—α、IFN-γ的水平相比較有顯著性差異(p<0.05)，而SIF+vitC+VitE能抑制上述因

5、子的釋放，與糖尿病對(duì)照組相比較有顯著性差異(p＜0.05)。 (4)大豆異黃酮等復(fù)合抗氧化劑可以拮抗2型糖尿病時(shí)胰島細(xì)胞的凋亡，降低胰島細(xì)胞的凋亡率，與糖尿病對(duì)照組相比較，差異有顯著性意義(p＜0.05)。 (5)大豆異黃酮等復(fù)合抗氧化劑可以阻斷凋亡因子Fas的促凋亡途徑，從而改善胰島細(xì)胞的凋亡狀況，與糖尿病對(duì)照組相比，差異有顯著性意義(P<0.05)。 結(jié)論：在體內(nèi)發(fā)生糖尿病時(shí)，機(jī)體通過氧化應(yīng)激作用影響胰島細(xì)胞