2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 光動(dòng)力學(xué)療法(PDT)作為腫瘤的局部療法,可誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生抗腫瘤免疫,與免疫療法(IT)聯(lián)合使用,即光免疫療法(PIT)可放大免疫應(yīng)答的強(qiáng)度。含非甲基化的胞嘧啶和鳥嘌呤核苷酸基序的寡聚脫氧核苷酸(CpG ODN)能誘導(dǎo)激活抗腫瘤免疫應(yīng)答,是一種安全有效的免疫佐劑?;贑pG ODN的這一特性,本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用PDT對(duì)小鼠Heps肝癌移植瘤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性治療,研究CpG ODN局部免疫治療是否能增強(qiáng)PDT對(duì)小鼠Heps肝癌移植瘤的抗腫瘤和免疫

2、效應(yīng),探討聯(lián)合治療的有效性,為臨床肝癌PIT治療肝癌,增強(qiáng)PDT療效提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 92只ICR小鼠,建立小鼠Heps肝癌移植瘤模型,隨機(jī)分為對(duì)照組、PDT組、IT組和PIT組,每組23只。PDT組小鼠尾靜脈注射光敏劑癌光啉(PSD-007)20 mg/kg體重,24小時(shí)后光照腫瘤局部,功率密度為150 mW/cm2,能量密度為135 J/cm2。免疫治療組的小鼠腫瘤局部注射CpG ODN 100ug。PIT組于P

3、DT后即刻在小鼠的腫瘤局部注射CpG ODN 100ug。 1.觀察各組小鼠生存期; 2.測量各組小鼠的腫瘤大小,計(jì)算體積抑瘤率; 3.各組分別于治療后2h、24h及72h分批處死5只小鼠,瘤組織取材,常規(guī)病理切片,HE染色; 4.取各組小鼠上述時(shí)間點(diǎn)的瘤組織切片,免疫組織化學(xué)染色計(jì)PCNA標(biāo)記指數(shù)(PCNA-LI),計(jì)數(shù)腫瘤局部巨噬細(xì)胞(Mφ)、CD8+細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CD8+CTL); 5

4、.于上述時(shí)間點(diǎn)收集各組小鼠的外周血并分離血清,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測小鼠血清中細(xì)胞因子干擾素(IFN)-γ和白細(xì)胞介素(IL)-12的分泌水平。 結(jié)果: 1.各組小鼠生存時(shí)間:PDT和PIT組小鼠的生存時(shí)間較對(duì)照組和單純免疫治療組相比,明顯延長(P<0.01)。PIT組小鼠生存時(shí)間較PDT組明顯延長(P<0.01)。IT組與對(duì)照組生存時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 2.各組小鼠腫瘤體積及抑瘤率:P

5、DT組、PIT組治療后2天、8天和16天移植瘤的體積均較對(duì)照組均明顯縮小(P<0.01)。PDT組、PIT組治療后8天以及16天的腫瘤體積較11r組和對(duì)照組均明顯縮小(P<0.05),PIT組腫瘤體積較單純PDT組明顯縮小(P<0.05)。IT組治療后8天和16天腫瘤體積均較對(duì)照組減小(P<0.01)。IT組、PDT組和PIT組治療后16天的抑瘤率分別為20.09%、73.88%、84.87%。 3.各組小鼠腫瘤HE染色:對(duì)照組

6、腫瘤細(xì)胞分布密集,呈彌漫性生長,細(xì)胞變性壞死及免疫細(xì)胞少見。PDT組治療后2h可見瘤細(xì)胞退變明顯,呈空泡變性;PDT后24h可見瘤細(xì)胞核固縮,大片狀壞死;PDT后72h見到瘤細(xì)胞形態(tài)消失,呈凝固性壞死,可見炎細(xì)胞浸潤。PIT組治療后可見腫瘤組織壞死明顯,較單純PDT組壞死面積更大,伴有大量炎細(xì)胞浸潤。IT組治療后,瘤組織壞死無明顯變化,僅有少許小灶性壞死,間質(zhì)中大量炎性細(xì)胞浸潤。 4.各組小鼠腫瘤PCNA-IHC染色:PDT組和

7、PIT組治療后2h、24h以及72h腫瘤局部PCNA-LI,均明顯低于對(duì)照組和單純免疫治療組(P<0.01)。PIT組上述時(shí)間點(diǎn)腫瘤局部PCNA-LI,明顯低于單純PDT組(P<0.01)。IT組治療后72h腫瘤局部PCNA-LI,明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。 5.各組小鼠腫瘤F4/80-IHC染色:PDT組和PIT組治療后2h、24h以及72h腫瘤局部巨噬細(xì)胞數(shù)量,均明顯高于荷瘤對(duì)照組和單純免疫治療組(P<0.05)。PI

8、T組上述時(shí)間點(diǎn)腫瘤局部巨噬細(xì)胞數(shù)量,明顯高于單純PDT組(P<0.01)。IT組治療后24h和治療后72h腫瘤局部巨噬細(xì)胞數(shù)量,明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。 6.各組小鼠腫瘤CD8a-IHC染色:PDT組、IT組和PIT組治療后72h后的腫瘤局部CD8+CTL數(shù)量,均明顯高于荷瘤對(duì)照組(P<0.05);PDT和PFT組治療后72h后腫瘤局部CD8+CTL數(shù)量明顯高于IT組(P<0.01);PIT組治療72h腫瘤局部CD8+C

9、TL數(shù)量明顯高于單純PDT組(P<0.01)。 7.各組小鼠血清中IL-12、IFN-γ水平:PDT組和PIT組治療后2h、24h以及72h,血清中細(xì)胞因子IL-12和IFN-γ水平均明顯高于對(duì)照組和單純免疫治療組(P<0.01)。PIT組治療后2h血清中IL-12水平,明顯高于單純PDT組(P<0.01);治療后24h.以及72h血清中IL-12、IFN-γ的水平,均明顯高于單純PDT組(P<0.05)。IT組治療后24h,血

10、清中細(xì)胞因子IL-12水平明顯高于對(duì)照組(P<0.01);治療后72h,IL-12和IFN-γ水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。 結(jié)論: 1.PDT可使小鼠Heps肝癌細(xì)胞變性壞死,降低PCNA標(biāo)記指數(shù),抑制腫瘤增殖,明顯延長荷瘤小鼠的生存時(shí)間。 2.PDT引起腫瘤局部Mφ、CD8+CTL浸潤及血清中IL-12、IFN-γ水平表達(dá)顯著增加,有效動(dòng)員宿主參與局部及全身抗腫瘤免疫應(yīng)答。 3.瘤內(nèi)局部注射免

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