冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流測定評價冠脈內(nèi)應用山莨菪堿對豬缺血-再灌注無復流心肌微循環(huán)影響的系列研究.pdf

1、本研究的內(nèi)容分為以下四個部分： 第一部分冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流測定評價豬缺血/再灌注心肌微循環(huán)功能障礙的研究 目的：本研究旨在應用與人類心血管生物學特性更為接近的小型豬作為模型動物，通過選擇性球囊擴張阻斷冠狀動脈前降支(LAD)血流,嗣后恢復血流灌注的方法，造成擬似急性心肌梗死缺血/再灌注損傷模型，應用冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流同步測定方法，評價豬缺血/再灌注心肌微循環(huán)功能的變化特征。 方法：8頭3～5個月齡的約克型

2、豬，采用自身對照的方法。在全麻和無菌條件下，采用非開胸方法，Seldinger法從左、右側(cè)深股動脈途徑置入6F動脈鞘，以4F冠脈造影管，(內(nèi)徑0.97mm)行冠狀動脈造影。6F導引導管超選LAD，經(jīng)指引導管分別送入壓力導絲和多普勒導絲，應用壓力及血流測量儀器進行冠脈口及遠端壓力和血流速度測定。根據(jù)LAD直徑選擇相應大小球囊，缺血預適應后持續(xù)閉塞左前降支45min，后撤出球囊，恢復冠脈血流灌注，缺血/再灌注制模成功。分別記錄基礎狀態(tài)、冠脈

3、再灌注即刻、30分鐘和60分鐘冠脈內(nèi)壓力階差和血流頻譜變化，獲取靜息和最大充血狀態(tài)下主動脈壓力(Pa)、冠脈遠端壓力(Pd)、平均峰值流速(average peak velocity,APV)，冠脈微血管阻力(MR)，同時獲取FFR、CFR參數(shù)。同時于基礎狀態(tài)、再灌注30min、60min、120min、180min分別從冠脈內(nèi)取血測定心肌壞死標記物CK-MB、Tn，應用5F四腔溫敏球囊漂浮導管測量肺毛細血管楔嵌壓(PCWP)，心輸出量

4、(CO)，經(jīng)左側(cè)股動脈途徑4Fpigtail連續(xù)監(jiān)測左室收縮壓(INSP)、左室舒張末期壓力(LVEDP)、十二導聯(lián)同步記錄心電圖(ECG)等參數(shù)。最大充血狀態(tài)由冠脈指引導管向冠脈內(nèi)注射罌粟堿后獲得。以血壓-心率指數(shù)(PRI)來反映制模前后心肌耗氧量的變化。實驗結(jié)束后即刻切取左心室前壁缺血區(qū)、正常區(qū)及兩者交界區(qū)心肌組織各6塊行光鏡病理學檢查。 小結(jié)：選擇性球囊高壓充盈擴張阻斷LAD血流然后釋放球囊的方法，可以造成急性心肌梗死缺血

5、/再灌注損傷模型，具有直觀、簡便、重復性好、低創(chuàng)傷性、閉胸、成功率高等優(yōu)點；冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流兩者結(jié)合，同步測定是目前客觀，可靠評價冠脈缺血/再灌注后心肌組織微循環(huán)功能的方法；缺血/再灌注心肌微循環(huán)功能表現(xiàn)為靜息血流速度增快，冠脈阻力減低，最大充血時血流速度減低，阻力增加，冠脈血流儲備減低，再灌注心肌耗氧量減少。 第二部分豬急性心肌梗死后無復流心肌微循環(huán)冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流特征 目的：通過選擇性球囊高壓充盈擴張阻斷

6、LAD血流后，冠脈內(nèi)注入無菌復合微血栓懸液的方法，造成擬似AMI再灌注后no-reflow模型，應用冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流同步測定，評價豬AMI再灌注后的no-reflow心肌微循環(huán)功能的變化特征。 方法：12頭約克型豬，采用自身對照的方法，應用4F JL3.5、JR4.0冠脈造影導管分別行左、右冠脈造影。6F指引導管超選LAD，分別送入壓力導絲和多普勒導絲，球囊擴張堵塞冠脈45min，撤除球囊間歇注入無菌復合微血栓懸液，應用可

7、量化的TIMI血流計幀數(shù)(TIMI frame count，TFC)、心肌組織灌注分級(TIMI myocardial perfusion grade，TMPG)，評價心肌組織灌注水平，以TIMI血流=2級或TFC>36.2幀、TMPG=1級作為AMI-no reflow模型成功標準。應用壓力及血流測量儀器進行冠脈口及遠端壓力和血流速度測定，分別評價記錄無復流前后靜息和最大充血狀態(tài)下Pa、Pd、APV，MR，同時獲取FFR、CFR參數(shù)。

8、同時應用4F Pigtail導管連續(xù)監(jiān)測LVEDP、LVSP以及左室內(nèi)壓上升和下降最大速率(the peak of left ventricular pressure risefall，±dp/dtmax)；應用5F四腔溫敏球囊漂浮導管至肺動脈測量PCWP，熱稀釋法測心輸出量(cardiac output，co)；監(jiān)測心電圖的變化，并于基礎狀態(tài)、無復流30min、60min、120min、180min，冠脈內(nèi)抽取血液標本，測定CK-MB

9、、cTn I。實驗結(jié)束后心肌組織取材行光鏡病理學檢查。 小結(jié)：采用選擇性球囊擴張阻斷LAD血流及恢復血流灌注后冠脈內(nèi)注射無菌復合微血栓懸液方法制作no reflow模型，具有直觀、簡便、重復性好、低創(chuàng)傷性、閉胸、成功率高等優(yōu)點，為心肌微循環(huán)障礙的研究提供了較好的實驗動物模型；冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流兩者結(jié)合同步測定，能夠直接、客觀地評價no reflow冠脈微循環(huán)功能狀態(tài)，表現(xiàn)為冠脈血流儲備分數(shù)正常，靜息和最大充血狀態(tài)下血流速度減

10、慢，冠脈阻力增加，冠脈血流儲備減低。 第三部分冠脈內(nèi)分次注射山莨菪堿對豬急性心肌梗死后無復流心肌微循環(huán)影響及冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流評價 目的：本研究在前期實驗的基礎上，應用冠脈內(nèi)壓力導絲和多普勒導絲同步測定，評價冠脈內(nèi)分次注入山莨菪堿對AMI-no reflow心肌微循環(huán)的影響，為臨床應用提供實驗依據(jù)。 方法：9頭4±1個月齡的約克豬，采用前期方法成功制備AMI-noreflow模型，隨機分為Saline對照組4

11、頭，Anisodamine組5頭。兩組即刻冠脈內(nèi)分3次分別給予生理鹽水5 ml/次、山莨菪堿200Qug/次冠脈內(nèi)注射，每次間隔5分鐘，即刻、5分鐘和10分鐘分三次行CAG，應用TFC和QCA測量系統(tǒng)分別對兩組冠狀動脈內(nèi)給藥后不同時間點的TFC和TMPG進行定量分析比較。經(jīng)指引導管分別送入壓力導絲和多普勒導絲，同步評價記錄兩組用藥前后靜息和最大充血狀態(tài)下Pa、Pd、APV、MR，并獲取FFR和CFR參數(shù)。應用5F四腔溫敏球囊漂浮導管測量

12、no reflow形成后即刻、用藥后即刻、5分鐘、10分鐘后PCWP的變化，熱稀釋法測量CO。采用4F pigtail于用藥前和用藥后即刻、5分鐘、10分鐘監(jiān)測LVSP、LVEDP。 小結(jié)：冠脈內(nèi)應用山莨菪堿可明顯增加靜息及最大充血狀態(tài)下無復流冠脈平均峰值血流速度，降低靜息及最大充血狀態(tài)無復流冠脈微循環(huán)阻力，增加冠脈血流儲備，迅速改善微循環(huán)障礙，改善心肌組織灌注。 第四部分冠脈內(nèi)預先注射山莨菪堿對豬缺血/再灌注心肌微循環(huán)

13、保護作用的研究 目的：在建立球囊擴張選擇性阻斷LDA再恢復血流灌注約克豬在體急性心肌梗死再灌注模型基礎上，通過預先冠脈內(nèi)注射山莨菪堿，應用冠脈內(nèi)壓力和多普勒血流同步測定技術，評價冠脈內(nèi)直接注射山莨菪堿對豬缺血/再灌注心肌的保護作用。 方法：10頭約克型豬隨機分為2組：山莨菪堿組(Anisodamine組，5頭)，制備模型前冠脈內(nèi)分次給予山莨菪堿；生理鹽水組(Saline組，5頭)，先予冠脈內(nèi)注射等量生理鹽水。6F導引導管

14、超選LAD，經(jīng)指引導管分別送入壓力導絲和多普勒導絲，制備缺血/再灌注損傷模型。應用壓力及血流測量儀器進行冠脈口及遠端壓力和血流速度測定。球囊閉塞左前降支(LAD)45分鐘造成心肌缺血，撤除球囊恢復冠脈血流再灌注；分別記錄兩組制模前后基礎狀態(tài)、冠脈再灌注即刻、30分鐘和60分鐘冠脈壓力和血流頻譜。獲取兩組靜息和最大充血狀態(tài)下Pa、Pd、APV、MR等參數(shù)，同時獲取FFR、CFR參數(shù)值。同時于基礎狀態(tài)、再灌注30min、60min、120m