海洋真菌H1-04次級(jí)代謝產(chǎn)物抗腫瘤活性成分研究.pdf

1、該文采用小鼠乳腺癌細(xì)胞tsFT210,以細(xì)胞周期抑制、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)及細(xì)胞壞死為活性指標(biāo),對海洋真菌H1-04次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行了生物活性篩選.結(jié)果表明,其次級(jí)代謝產(chǎn)物對tsFT210細(xì)胞系具有細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和細(xì)胞壞死作用.我們采用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)的活性測試方法對其次級(jí)代謝產(chǎn)物的抗腫瘤成分進(jìn)行了活性追蹤研究.對H1-04分別進(jìn)行了穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)、萃取實(shí)驗(yàn)和時(shí)效曲線實(shí)驗(yàn),確定了菌株的最佳發(fā)酵條件.依照預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,發(fā)酵到第6天的H1

2、-04次級(jí)代謝產(chǎn)物依次用有效萃取溶劑環(huán)己烷、氯仿萃取,對得到的活性部位環(huán)己烷層和氯仿層分別采用減壓硅膠柱層析、凝膠柱層析(Sephadex LH-20)、反相硅膠柱層析和反相制備高效液相(HPLC)等分離手段分離得到6個(gè)單體化合物(1,2,3,4,5,6).利用理化性質(zhì)和光譜學(xué)方法(UV、IR、MS、1D-NMR和2D-NMR)闡明了6個(gè)化合物的結(jié)構(gòu).流式細(xì)胞術(shù)及SRB法測試結(jié)果表明,化合物1、2和6具有顯著的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和細(xì)胞壞死作用