激光激發(fā)5-氨基乙酰丙酸己酯選擇性殺傷人紅白血病細(xì)胞株.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文激光激發(fā)5-氨基乙酰丙酸己酯選擇性殺傷人紅白血病細(xì)胞株姓名：盧曉珣申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液病）指導(dǎo)教師：郭坤元20080424中文摘要多藥耐藥細(xì)胞株K 5 6 2 ／A D M 和人正常臍血單個(gè)核細(xì)胞( c o r db l o o dm o n o n u l c e a rc e l l ，C B M C ) 的殺傷效應(yīng)。探討H e ．A L A ．P D T 是否具備有效殺傷多藥耐藥白血病細(xì)胞而

2、不影響正常造血干細(xì)胞的功能；篩選出H e ．A L A ．P D T 殺傷白血病細(xì)胞的最佳光動(dòng)力作用條件；并進(jìn)一步探討白血病細(xì)胞的死亡方式。為清除白血病細(xì)胞，及下一步將H e ．A L A ．P D T 應(yīng)用于自體造血干細(xì)胞移植的移植物體外凈化，降低移植復(fù)方率方面提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法第一章激光激發(fā)5 ．氨基乙酰丙酸己酯選擇性殺傷人多藥耐藥白血病細(xì)胞株K 5 6 2 ／A D M 與親本細(xì)胞株K 5 6 2 的光動(dòng)力作用條件研究比較不同濃度

3、的米托蒽醌、柔紅霉素對(duì)K 5 6 2 、K 5 6 2 ／A D M 細(xì)胞殺傷效果的異同。細(xì)胞分4 組：光動(dòng)力( P D T ) 組( a n 光敏劑又接受光照) 、激光組( 不加光敏劑只接受光照) 、暗毒性組( 只加光敏劑而不接受光照) 、正常對(duì)照組( 不加光敏劑又不接受光照) 。用不同濃度( O ．0 2 5 、0 ．1 、O ．4 、1 ．6 m m o l ／L ) 的H e ．A L A 避光孵育細(xì)胞，然后給予6 3 0 n

4、m 波長(zhǎng)的不同功率密度( 4 ．5 、9 、1 8 、3 6 J ／c m 2 ) 的激光照射后，繼續(xù)培養(yǎng)1 2 h ，再測(cè)定細(xì)胞存活率。比較單一因素( 激光或光敏劑) 和聯(lián)合因素( 激光+ 光敏劑) 對(duì)白血病細(xì)胞殺傷效果的異同；‘觀(guān)察光動(dòng)力作用各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；并篩選出最佳的光動(dòng)力作用條件；在所篩選的條件下，探討光動(dòng)力作用對(duì)入正常臍血單個(gè)核細(xì)胞( C o r d b l o o d m o n o n u c l e a r c e

5、 l l ，C B M C ) 的殺傷作用。第二章激光激發(fā)5 ．氨基乙酰丙酸己酯對(duì)人多藥耐藥白血病細(xì)胞株K 5 6 2 ／A D M與親本細(xì)胞株K 5 6 2 的體外殺傷研究細(xì)胞分為P D T 組和正常對(duì)照組，以第一章篩選的光動(dòng)力作用條件作用于K 5 6 2 、K 5 6 2 ／A D M 細(xì)胞。瑞氏染色觀(guān)察光動(dòng)力作用后白血病細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)K 5 6 2 、K 5 6 2 ／A D M 細(xì)胞內(nèi)光敏劑的熒光強(qiáng)度；采用甲基纖