大鼠糖尿病視網(wǎng)膜病變模型研究中眼底造影技術(shù)的改進(jìn).pdf

1、研究背景：
　　糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic retiopathy, DR)位居不可逆致盲性眼底病的首位，大鼠模型廣泛應(yīng)用于防治DR的藥物、基因?qū)嶒?yàn)中。以往的研究證實(shí)，大鼠DR的典型病理改變?yōu)橐暰W(wǎng)膜血管滲漏、周細(xì)胞減少、毛細(xì)血管閉塞等特征，準(zhǔn)確高效地觀察到這些改變，無疑對(duì)理解DR、高效合理地應(yīng)用本模型有著重要意義。但目前用無色素大鼠（如Sprague Dawley大鼠、Wister大鼠等）制作的DR模型，在活體大鼠體內(nèi)使用眼

2、底熒光造影檢查時(shí)，看不到清晰的視網(wǎng)膜血管滲漏等大體病理特征;另外，使用臨床常用的眼底造影設(shè)備HRA-Ⅰ，需要耗費(fèi)大量的時(shí)間調(diào)整眼位且尾靜脈注射造影劑困難。
　　目的：
　　建立一種新的眼底血管造影（Fundus Fluorescence Angiography， FFA）技術(shù)，Micron-Ⅲ小動(dòng)物成像儀聯(lián)合腹腔注射造影劑檢查有色素(Brown Norway RatBN)大鼠誘導(dǎo)的糖尿病模型，獲得清晰的視網(wǎng)膜血管病理圖像，為

3、DR防治奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　?、俳】礏N大鼠和(Sprague Dawley Rat) SD大鼠（體重200～250g）各15只，尾靜脈一次性注射55mg/Kg鏈脲佐菌素(STZ)，制作Ⅰ型大鼠糖尿病模型。造模后，每周鼠尾斷端采血檢測(cè)血糖，8周后，血糖值穩(wěn)定于16.7mmol/l-27.8mmol/l的大鼠各10只納入研究;②以右眼為實(shí)驗(yàn)眼，裂隙燈照相觀察2組動(dòng)物的眼前節(jié)變化;③Micron-Ⅲ小動(dòng)物眼底成像系統(tǒng)聯(lián)合腹

4、腔注射熒光素鈉造影劑，行眼底照相和FFA檢查，記錄2組動(dòng)物的眼底情況;④2組大鼠各取3只，制作視網(wǎng)膜血管消化鋪片，過碘酸雪夫(Periodic Acid SchiffStain，PAS)常規(guī)染色，顯微鏡下觀察血管的形態(tài)學(xué)改變;⑤對(duì)眼底造影圖像清晰的大鼠，3日后，使用目前的技術(shù)“海德堡眼底造影儀HRA-Ⅱ聯(lián)合尾靜脈注射造影劑”進(jìn)行再次檢查，比較2種不同造影技術(shù)所需要的準(zhǔn)備時(shí)間及圖像差異。
　　結(jié)果：
　　①8周后，10只BN大

5、鼠和10只SD大鼠符合血糖標(biāo)準(zhǔn)，納入研究。2組動(dòng)物血糖數(shù)值無明顯差異(P＞0.05);②BN組5只出現(xiàn)白內(nèi)障(5/10)，SD組6只出現(xiàn)白內(nèi)障(6/10)，無明顯差異(P＞0.05);③在棕褐色背景下，BN組視網(wǎng)膜血管顯影清晰，無脈絡(luò)膜背景熒光干擾，10只動(dòng)物FFA出現(xiàn)了血管迂曲、無灌注區(qū)、血管滲漏等典型糖尿病樣改變(10/10)，而SD組由于迅速的脈絡(luò)膜背景熒光干擾，視網(wǎng)膜血管顯影不清晰，未見典型糖尿病樣改變(0/10)，2組有顯著性

6、差異(P＜0.05)。④2組動(dòng)物視網(wǎng)膜血管鋪片上可發(fā)現(xiàn)典型的DR形態(tài)學(xué)變化(6/6 vs.6/6)，如血管迂曲成袢，無細(xì)胞毛細(xì)血管等，無明顯差異(P＞0.05);⑤使用Micron-Ⅲ小動(dòng)物眼底成像系統(tǒng)聯(lián)合腹腔注射熒光素鈉造影劑可迅速開展造影，平均準(zhǔn)備時(shí)間57.50±8.17s(n=7)，而采用傳統(tǒng)的海德堡眼底造影儀HRA-Ⅱ和尾靜脈注射造影劑，準(zhǔn)備時(shí)間則需320.34±38.79s(n=7)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，新方法平

7、均節(jié)省260s。2組FFA圖像無顯著性差異，僅為注射熒光素鈉后眼底顯影時(shí)間略有不同。尾靜脈注射后3～5s眼底開始熒光顯影，而腹腔注射后，需要腹膜吸收再入血存在著5s左右的時(shí)間滯后性，導(dǎo)致早期相不太清楚，但是中期相動(dòng)脈與靜脈顯影清晰度和持續(xù)時(shí)間比較理想。
　　結(jié)論：
　　Micron-Ⅲ視網(wǎng)膜影像系統(tǒng)聯(lián)合腹腔注射熒光素鈉是一種簡易有效的大鼠眼底檢查技術(shù);BN大鼠眼底有棕褐色色素，其暗房效應(yīng)使得眼底照相、FFA效果明顯優(yōu)于SD大