巢式RT-PCR法檢測非小細胞肺癌外周血中微轉移及其臨床應用.pdf

1、目的：研究非小細胞肺癌(NSCLC)患者外周血中CK19mRNA表達的臨床意義。 方法：1、采用巢式逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測110例NSCLC患者、19例良性肺疾病患者及22例健康人外周血CK19mRNA的表達，趨勢卡方檢驗分析NSCLC患者外周血CK19mRNA表達與臨床分期的關系。2、對NSCLC患者進行隨訪，分組統(tǒng)計分析手術治療患者及晚期患者外周血CK19mRNA表達與無病生存率、無病生存時間及總生存時間的關

2、系，并采用COX模型對影響復發(fā)的因素進行分析。3、以SPC-A1肺癌細胞株CK-19mRNA表達水平為參照，監(jiān)測4例肺腺癌患者化療前后外周血癌細胞數(shù)相對變化，初步探討其作為早期療效評價指標的可行性。 結果：1、110例NSCLC患者外周血CK19mRNA陽性表達率為56.4％，高于良性肺疾病患者的5.26％(χ2=16.932，P＜0.001)，而22例健康人外周血中均無CK19mRNA表達，NSCLC患者外周血CK-19mRN

3、A的陽性表達率隨著臨床分期升高而呈增加趨勢(χ2=4.768，p=0.029)。2、45例手術治療的患者中，外周血CK-19mRNA表達陽性者術后一年和二年的無病生存率分別為65％和34.3％，而陰性者分別為76％和64％。陽性者的中位無病生存時間為18個月，少于陰性者的27個月(LogRank值=4.07，p=0.04)。多因素分析表明，術后化療的周期數(shù)、臨床分期和CK-19mRNA表達是影響NSCLC患者術后復發(fā)時間的主要因素。而在

4、晚期患者中，外周血CK-19mRNA表達對其生存時間沒有明顯影響(LogRank值=0.7337，p=0.7338)。4、化療療效為部份緩解(PR)的2例患者，其外周血癌細胞相對數(shù)量由化療前的28個和22個/mL降到化療后的6個和5個/mL，而療效為進展(PD)的2例患者，外周血癌細胞相對數(shù)量無明顯改變。初步表明，外周血癌細胞相對數(shù)量的變化可反映治療效果。 結論：巢式RT-PCR方法檢測外周血CK-19mRNA對非小細胞肺癌患者