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1、Y957641抗血管形成多靶點(diǎn)復(fù)合抗原抑瘤活性的初步研究研究生:導(dǎo)師:指導(dǎo)教師:專業(yè):申請(qǐng)學(xué)位:培養(yǎng)單位:劉穎凌世淦研究員于繼云副研究員生物化學(xué)與分子生物學(xué)理學(xué)博士軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所研究起止日期:2004年3月2006年4月論文提交日期:2006年5月中文摘要抗血管形成多靶點(diǎn)復(fù)合抗原抑瘤活性的初步研究中文摘要腫瘤血管形成與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。以血管為靶點(diǎn)、抑制血管形成,從而抑制腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移已經(jīng)成為一種重要的腫
2、瘤治療途徑。本研究選取了與腫瘤血管形成密切相關(guān)的VEGF—E、VEGF—R2和整合素aVl33作為直接靶標(biāo),設(shè)計(jì)并合成了針對(duì)以上三種靶點(diǎn)的異種化的靶抗原,每個(gè)異種化的靶抗原中至少含有兩種物種的同源基因片段,物種涉及小鼠、口瘡病毒、鵪鵓、人類(lèi)和非洲爪蟾;然后將上述三種異種化的靶抗原融合形成抗血管形成的多靶點(diǎn)復(fù)合抗原——ERV融合抗原。利用上述抗原構(gòu)建DNA疫苗,在小鼠模型中初步評(píng)價(jià)了各疫苗間抑瘤活性的差異。證實(shí)上述三種異種化靶抗原及多靶點(diǎn)
3、ERV復(fù)合抗原DNA疫苗,均能夠在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)良好的體液免疫應(yīng)答,產(chǎn)生抗原特異性抗體,抗體效價(jià)最高可以達(dá)到1:10000;同時(shí)也誘導(dǎo)產(chǎn)生了特異性的細(xì)胞免疫應(yīng)答,CD4細(xì)胞/CD8細(xì)胞比值上升,分泌IFNy和IL4的T細(xì)胞數(shù)量顯著增加。免疫小鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)證實(shí),上述三種異種化抗原及多靶點(diǎn)ERV復(fù)合抗原DNA疫苗均能夠有效延長(zhǎng)小鼠成瘤時(shí)間、抑制腫瘤的生長(zhǎng)并使小鼠的存活率大大提高;其中多靶點(diǎn)復(fù)合抗原ERV組的小鼠成瘤時(shí)間延長(zhǎng)至19天左右(P
4、BS和空載體對(duì)照組的成瘤時(shí)間為8~9天),小鼠的存活率提高到83%(PBS和空載體對(duì)照組為33%),腫瘤抑制率達(dá)9536%(PBS和空載體對(duì)照組瘤重達(dá)509i0339和59340969,而多靶點(diǎn)復(fù)合抗原ERV組瘤重僅為020士0169)。本研究同時(shí)從RCC細(xì)胞系中克隆出腎癌特異性抗原G250MN/CAIX并成功構(gòu)建了含有該抗原的DNA疫苗,為進(jìn)一步開(kāi)展聯(lián)合應(yīng)用腫瘤特異性靶抗原疫苗和抗血管生成靶抗原疫苗進(jìn)行協(xié)同免疫治療奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:
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