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1、目的:以急性髓性細胞白血病細胞HL-60細胞凋亡作為研究終點,利用熒光探針JC-1觀察HL-60細胞凋亡線粒體膜電位的變化,同時用熒光探針Calcein AM熒光染色檢測線粒體通透轉(zhuǎn)換孔開放的程度。 方法:正常培養(yǎng)HL-60細胞,濃度調(diào)節(jié)至1.5 × 105/ml,按照不同的處理方法進行分組:1.對照組:僅在無依托咪酯的正常培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h:2.損傷組:用含500μM依托咪酯的培養(yǎng)基刺激24h。收集細胞后,流式細胞儀利用熒光探
2、針JC-1檢測細胞線粒體膜電位的改變,熒光探針Calcein AM熒光染色檢測線粒體通透轉(zhuǎn)換孔開放的程度。 結(jié)果:JC-1檢測細胞線粒體膜電位改變的實驗結(jié)果顯示,損傷組綠色熒光細胞數(shù)目占全部細胞的比例為41.72%,明顯高于對照組3.53%;線粒體通透轉(zhuǎn)換孔開放(MPTP)試驗中,損傷組平均熒光強度為3.54,明顯低于對照組熒光強度33.71。 結(jié)論:高濃度依托咪酯誘發(fā)HL-60細胞凋亡的途徑之一為通過激活線粒體通透轉(zhuǎn)換
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