紅活麻有效部位對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療作用和機制研究.pdf

1、目的：研究紅活麻乙酸乙酯部位抗炎鎮(zhèn)痛的藥效作用；觀察紅活麻有效部位在Ⅱ膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎模型（CIA）和佐劑關(guān)節(jié)炎模型（AA）中的抗自身免疫性關(guān)節(jié)炎的作用；分別以樹突狀細胞DC和T淋巴細胞中轉(zhuǎn)錄因子T-bet和T細胞中GATA-3表達水平的變化，以及血清細胞因子IFN-γ與IL-4,IL-2與IL-10的測定來探討紅活麻有效部位抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的機制。 方法: （1）將正常昆明種小鼠隨機分為紅活麻高、低劑量組，陽性對照組，模

2、型對照組，高、低劑量給藥組分別按10mg/10g、5mg/10g的劑量灌胃給予紅活麻乙酸乙酯部位混懸液，連續(xù)給予7天，陽性對照組于第7天給予阿司匹林1.8mg/10g，分別采用熱板法、醋酸扭體法和二甲苯致炎法，觀察紅活麻抗炎鎮(zhèn)痛的作用； （2）在BALB/c小鼠體內(nèi)建立II型膠原所致關(guān)節(jié)炎模型。在造摸前7天開始，分別按1.5mg/10g、1.0mg/10g、0.5mg/10g的劑量，隔日灌胃給藥，連續(xù)40天，通過組織病理學(xué)檢查觀

3、察紅活麻乙酸乙酯部位對關(guān)節(jié)炎發(fā)病和關(guān)節(jié)損傷的影響；向Wistar大鼠右后足跖皮內(nèi)注射弗氏完全佐劑（CFA）0.1ml，建立佐劑關(guān)節(jié)炎模型。在造模前7天開始預(yù)防給藥17.5mg/100g，造模后7天治療給藥17.5mg/100g，隔日灌胃給藥，連續(xù)39天，利用關(guān)節(jié)腫脹度、脾臟指數(shù)等指標以及關(guān)節(jié)損傷的情況，觀察紅活麻對關(guān)節(jié)炎發(fā)病的影響。驗證紅活麻乙酸乙酯部位的治療RA的作用； （3）檢測紅活麻對樹突狀細胞表型、細胞中轉(zhuǎn)錄因子T-be

4、t表達水平以及細胞因子IL-10、IFN-γ分泌量的影響；檢測藥物處理后動物脾臟細胞中轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3表達水平的變化以及血清細胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的分泌量，探討紅活麻治療類風(fēng)濕型關(guān)節(jié)炎的作用機理。 結(jié)果： （1）在熱板實驗中，與模型對照組比較，10mg/10g、5mg/10g紅活麻組均可顯著性提高小鼠痛閾（P<0.05）；與模型對照組比較，10mg/10g、5mg/10g紅活麻

5、組均可顯著性減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，高劑量組尤其明顯明顯（P<0.01）；與模型對照組比較，10mg/10g、5mg/10g紅活麻組均可顯著性抑制二甲苯所致右耳的腫脹度（P<0.01）； （2）在II型膠原所致關(guān)節(jié)炎模型中，給藥40天后發(fā)現(xiàn)，紅活麻呈劑量依賴性地降低CIA關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率，與空白對照組相比有顯著差異（P<0.01）；與模型組比較，高劑量組、中劑量組關(guān)節(jié)炎指數(shù)均顯著下降，高劑量組尤為明顯（P<0.05）；足關(guān)節(jié)滑膜

6、組織HE染色檢查發(fā)現(xiàn)，給予紅活麻能有效減少炎性細胞浸潤，關(guān)節(jié)間隙基本完好。佐劑關(guān)節(jié)炎模型中，發(fā)現(xiàn)17.5mg/100g紅活麻乙酸乙酯部位能顯著性降低關(guān)節(jié)腫脹度、脾臟指數(shù)；紅活麻乙酸乙酯部位預(yù)防和治療給藥組大鼠關(guān)節(jié)滑膜增生，只有少許剝脫，組織水腫較輕，并見少量炎性細胞浸潤。 （3）1.5mg/10g、1.0mg/10g、0.5mg/10g紅活麻乙酸乙酯部位組對BALB/c小鼠骨髓來源DCT-bet mRNA轉(zhuǎn)錄水平有明顯下調(diào)作用，

7、且顯著性降低DC上清中IFN-γ分泌量，提高IL-10的分泌量，對DC表面分子的表達無明顯影響；明顯下調(diào)小鼠體內(nèi)T細胞T-bet mRNA轉(zhuǎn)錄水平，而上調(diào)GATA-3mRNA轉(zhuǎn)錄水平。ELISA檢測結(jié)果顯示，紅活麻乙酸乙酯部位明顯抑制Th1型細胞因子的分泌，促進Th2型細胞因子的分泌。 結(jié)論： （1）紅活麻乙酸乙酯部位灌胃給藥可明顯緩解疼痛、治療炎癥； （2）不同劑量紅活麻灌胃給藥均能顯著降低II型膠原所致的關(guān)