阻斷Sonic hedgehog信號(hào)傳導(dǎo)通路逆轉(zhuǎn)難治性急性髓系白血病細(xì)胞耐藥及其機(jī)制研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級(jí)博士學(xué)位論文阻斷Sonichedgehog信號(hào)傳導(dǎo)通路逆轉(zhuǎn)難治性急性髓系白血病細(xì)胞耐藥及其機(jī)制研究ReversalofdrugresistancebyinhibitingSonichedgehogsignalpathwayinrefractoryacutemyeloidleukemiaandtheunderlyingmechanism課題來(lái)源：廣東省自然科學(xué)基金($2011010003807)學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專(zhuān)業(yè)

2、名稱(chēng)培養(yǎng)類(lèi)型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員黃凱凱孟凡義教授主任醫(yī)師內(nèi)科學(xué)(血液病)專(zhuān)業(yè)學(xué)位博士研究生第一臨床醫(yī)學(xué)院林東軍教授王順清教授朱志剛教授孫競(jìng)教授楊默教授2014年3月10日廣州摘要AMLM2a的原代細(xì)胞基因譜表達(dá)差異顯著，難治性AMLM2a發(fā)生發(fā)展受一極其復(fù)雜的生物信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，其中Soncihedgehog遁i路很可能是其中的上游通路，并對(duì)其它信號(hào)通路起調(diào)節(jié)作用。哺乳動(dòng)物體內(nèi)Sonichedgehog蛋白質(zhì)家

3、族有三個(gè)成員，分別為Shh(Sonichedgehog)、Ihh(Indianhedgehog)、Dhh(Deserthedgehog)，其ePShh表達(dá)最為廣泛，與多種器官的發(fā)育形成有關(guān)，主要由信號(hào)分子Shh、膜受體patched(Ptch)、smoothened(Smo)、一些中間傳遞分子和核轉(zhuǎn)錄因子Glis組成。該通路在胚胎發(fā)育、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定及組織損傷后的修復(fù)和再生中起重要作用。其異常激活能導(dǎo)致多種腫瘤如基底細(xì)胞癌、髓母細(xì)胞瘤、

4、胰腺癌、前列腺癌等的形成。血液系統(tǒng)疾病中己證實(shí)該通路和慢性粒細(xì)胞白血病(CML)干細(xì)胞的增殖、CD341蘭I血病細(xì)胞的耐藥及淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)。但該通路和難治性AML的關(guān)系、是否可以逆轉(zhuǎn)難治，[生AML耐藥及與其它信號(hào)通路的關(guān)系尚無(wú)研究。本課題擬研究Shh通路在難治性AML原代細(xì)胞及細(xì)胞株中的表達(dá)情況及其與臨床預(yù)后的關(guān)系、通路阻斷齊UNVP—LDE225作用于HL60／ADM細(xì)胞的抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡及逆轉(zhuǎn)耐藥作用機(jī)制，從而試圖剖析

5、Shh通路在難治性AML發(fā)生發(fā)展中的分子作用機(jī)制，為尋求早期診斷難治性AML的指標(biāo)、新的治療靶點(diǎn)及有效防治難治性AML的提供依據(jù)。研究對(duì)象與方法：1、Shh通路表達(dá)的檢測(cè)：①選擇HL60細(xì)胞、對(duì)應(yīng)多藥耐藥細(xì)胞HL60／ADM及35例難治性AML和38例非難治AML患者骨髓的單個(gè)核細(xì)胞，QRTPCR檢測(cè)細(xì)胞株和其中19例難治性AML、23例非難治性AML單個(gè)核細(xì)胞中Shh通路組分Gli1、Ptch、Smo基因的表達(dá)情況。②提取細(xì)胞株及原代