藻毒素Microcystin-LR的體內(nèi)及體外遺傳毒性實驗研究.pdf

1、目的:研究MCLR體內(nèi)及體外遺傳毒性并探討其可能的作用機制.方法:(Ⅰ)應(yīng)用人類淋巴母細胞TK6研究MCLR的體外遺傳毒性.在4h及24h染毒細胞后,分別進行細胞毒性試驗、微核試驗、TK基因突變試驗.分離自發(fā)及MCLR誘發(fā)tk基因缺失突變體并分析雜和性丟失現(xiàn)象.(Ⅱ)應(yīng)用轉(zhuǎn)基因小鼠(Muta<'TM> Mouse)研究MCLR的體內(nèi)遺傳毒性.連續(xù)4周染毒后檢測小鼠肝臟、肺臟轉(zhuǎn)基因lacZ及cⅡ突變頻率及觀察是否誘發(fā)外周血微核產(chǎn)生.同時檢

2、測MCLR是否具有協(xié)同致癌劑DEN誘發(fā)突變的作用.分析cⅡ基因突變頻譜可研究MCLR致突變的分子特征.(Ⅲ)應(yīng)用基因芯片Atlas<'TM>Glass Human1.0 cDNA Microarray系統(tǒng)研究MCLR對TK6細胞1090基因表達譜的影響.結(jié)論:1.體外24h染毒TK6細胞MCLR可致突變并表現(xiàn)出斷裂劑特性,誘發(fā)雜和性丟失(LOH)而非點突變.其體外遺傳毒性可能與其可誘發(fā)DNA雙鏈斷裂(DSBs)或可促進DSBs相關(guān).2.