RNA干擾沉默HIF-1α基因?qū)θ四I癌細(xì)胞株786-O裸鼠移植瘤生長的影響.pdf

1、目的：采用RNA干擾靶向沉默HIF-1α基因的表達(dá)，研究其對人腎癌細(xì)胞株786-O裸鼠移植瘤生長的影響。
　　方法：將人腎癌786-O細(xì)胞體外培養(yǎng)，選取對數(shù)生長期細(xì)胞接種于裸鼠右側(cè)前肢腋窩皮下致瘤，15天后隨機(jī)分成三組：實(shí)驗(yàn)組（重組質(zhì)粒組）、陰性對照組（空載體組）、空白對照組。利用本課題組前期已成功構(gòu)建并通過驗(yàn)證有效的HIF-1α基因的siRNA表達(dá)載體多點(diǎn)注射于移植瘤瘤內(nèi)及瘤周；空載體對照組予以等量空載體多點(diǎn)注射瘤內(nèi)及瘤周；空白

2、對照組不做任何處理，每3天注射一次，共注射8次，統(tǒng)計(jì)移植瘤生長體積。50天時(shí)，頸椎脫臼法處死裸鼠，剝離瘤體組織，稱重，并采用免疫組化檢測HIF-1α、VEGF蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：常規(guī)病理切片證實(shí)各組均成功建立裸鼠人腎癌的皮下移植瘤模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組裸鼠移植瘤的生長較陰性對照組和空白對照組明顯受到抑制（P<0.01），陰性對照組和空白對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。免疫組化結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組HIF-1α、VEGF蛋