基于雜交鏈式反應檢測赭曲霉毒素A的高效電化學適體傳感器研究.pdf

1、赭曲霉毒素（Ochratoxins,OTs）是一種由赭曲霉、碳黑曲霉和純綠青霉產(chǎn)生的食源性毒素，主要污染糧谷類農(nóng)產(chǎn)品，與人類和動物健康關系密切。其中以赭曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）的毒性最大、散布最廣、污染程度最高。本研究利用電化學適體傳感器基于雜交鏈式反應研發(fā)設計了一種擁有超低檢測限的OTA檢測方法。首先，將一段捕獲探針固定在金電極上，然后加入與之互補的OTA適配體序列，使其與捕獲探針形成DNA雜交鏈。在環(huán)境中存在O

2、TA的情況下，雜交鏈上的OTA適配體會與游離的OTA結(jié)合，脫離電極。然后，加入檢測探針和兩段生物素標記的互補DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)，與電極上剩余的捕獲探針結(jié)合，并引發(fā)雜交鏈式反應。最后，在電極上滴加堿性磷酸酶（ST-AP），它與DNA鏈上的生物素結(jié)合，通過催化反應底物中的α-萘酚磷酸鹽（α-NP）產(chǎn)生電化學信號，DPV曲線隨OTA濃度的增高而增高。在優(yōu)化條件下，該檢測平臺對OTA的檢測線性范圍是0.005-100 ng/mL，檢測限可達2 pg