農(nóng)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的檢測方法研究.pdf

1、本論文對農(nóng)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的檢測方法研究進行了闡述。試驗中分別對檢測赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的高效液相色譜參數(shù)、農(nóng)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的提取與凈化方法、改進后的高效液相色譜法與薄層色譜法、酶聯(lián)免疫吸附檢測方法和我國進出口出入境檢驗檢疫局的研究人員建立的高效液相色譜法對比試驗的研究進行了探索。具體結(jié)果如下：
　　 選用谷物（大豆、小麥、大麥、玉米、大米）、酒類（白酒、啤酒）、速溶咖啡樣品各8批、豬配合飼料16批。

2、研究檢測以上各種樣品中赭曲霉毒素A的高效液相色譜方法，建立快速有效的前處理方法以及檢測過程中適宜的實驗參數(shù)，并通過回收率、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗和方法檢測限來說明建立的高效液相方法是否具有較好的實用性。同時，將本試驗改進的高效液相色譜法與國家標準薄層色譜法、ELISA方法、SN/T1746-2006進出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A的HPLC檢驗方法進行了回收率、精密度和檢測限對比。試驗結(jié)果表明，在檢測OTA過程中，熒光檢

3、測器的激發(fā)波長為333nm，發(fā)射波長為460nm;色譜柱柱溫為30℃；采用乙腈-醋酸鈉(60:40)-1g/L十六烷基三甲基溴酸銨(pH=6.0)為檢測農(nóng)產(chǎn)品中OTA的流動相，流速為1mL/min;分別選擇以氯仿-磷酸、1％聚乙二醇8000-5％NaHCO3和甲醇-3％碳酸氫鈉(1:1)+三氯甲烷溶液作為提取谷物與豬配合飼料、酒類（白酒、啤酒）和速溶咖啡中OTA的較為優(yōu)化的提取溶劑系統(tǒng)，選擇免疫親和柱凈化法檢測農(nóng)產(chǎn)品中的OTA具有較高回

4、收率。改進的HPLC法的檢測限為0.53μg/kg（ELISA法為2.5μg/kg,SN/T法為1μg/kg）；精密度實驗的相對標準偏差(RSD)為0.91％；回收率實驗中，大豆的回收率為90.8％～96.2％，小麥的回收率為92.5％～96％，大麥的回收率為93.0％～98.2％,玉米的回收率為92.7％～96.8％，大米的回收率為97.5％～99.2％，豬配合飼料的回收率為90.1％～97.2％，白酒的回收率≥99.0％，啤酒的回收

5、率≥98.5％，速溶咖啡的回收率≥97.3％。從檢測限、精密度和回收率對比得知，改進的HPLC法優(yōu)于ELISA法、SN/T1746方法。
　　 選用谷物（大豆、小麥、大麥、玉米、大米）樣品各8批、豬、鴨配合飼料樣品各16批、酒類（白酒、啤酒）樣品各8批。研究檢測以上各種樣品中嘔吐毒素的高效液相色譜方法，并通過回收率、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗和方法檢測限來說明建立的高效液相方法是否具有較好的實用性。同時，與國家標準薄層色譜法、E

6、LISA方法、SN/T1571-2005《進出口糧谷中嘔吐毒素檢驗方法液相色譜法》進行了回收率、精密度和檢測限對比。試驗結(jié)果表明，在檢測DON過程中，紫外檢測波長為220nm;色譜柱柱溫選擇為35℃；選擇采用乙腈-水(84:16)為檢測農(nóng)產(chǎn)品中DON的流動相，流速為0.5mL/min;選擇以乙腈-水(84:16)+NaCl作為提取谷物及豬鴨配合飼料、酒類（白酒、啤酒）中DON的較為優(yōu)化的提取溶劑系統(tǒng)，選擇免疫親和柱凈化法檢測農(nóng)產(chǎn)品中的D

7、ON具有較高回收率。改進的HPLC法的檢測限為0.0175mg/kg（ELISA法為0.1mg/kg,SN/T法為0.040mg/kg）；精密度實驗的相對標準偏差(RSD)為0.36％；回收率實驗中，大豆的回收率為95.6％～98.2％，小麥的回收率為93.8％～99.6％，大麥的回收率為93.0％～99.2％，玉米的回收率為95.5％～98.9％，大米的回收率為94.7％～99.9％，豬配合飼料的回收率為94.1％～99.7％，鴨配合