慢病毒介導RNA干擾Cdh1的表達對大鼠脊髓損傷的修復作用.pdf

1、目的：觀察大鼠脊髓損傷后皮層體感運動區(qū)Cdh1 mRNA的表達變化，探討慢病毒介導RNA干擾Cdh1的表達對脊髓損傷修復的作用。
　　 方法：20只雄性成年健康SD大鼠隨機分為正常對照組和手術組（1wk組、2wk組），手術組采用Allen氏法在T10-T11建立脊髓打擊損傷模型，正常對照組僅咬除T10椎板。1wk、2wk后分別取大鼠前囟后體感運動皮層區(qū)域，然后提取組織總RNA，采用實時熒光定量PCR檢測Cdh1 mRNA的表達變

2、化。另30只雄性成年SD大鼠隨機分為生理鹽水注射組（A組，n=10），空慢病毒注射組（B組,n=10）和重組慢病毒注射組（C組，n=10）。3組均采用改良Allen氏法建立脊髓打擊損傷模型，術后1wk分別在大鼠前囟后體感運動皮層區(qū)注射生理鹽水、空慢病毒和重組慢病毒，注射10d后每組取5只采用實時熒光定量PCR檢測法檢測Cdh1 mRNA的表達并且在術后不同時間點對大鼠進行運動功能采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB

3、)評分標準評估，術后第6wk用同樣的方法在原皮層區(qū)域注射10％BDA-TR（Biotinylated Dextran Amine-Texas Red）。術后8wk處死并用4％多聚甲醛灌注固定取脊髓損傷區(qū)域作冰凍連續(xù)縱切片,熒光顯微鏡下直接觀察。
　　 結(jié)果：大鼠脊髓損傷后1wk和2wk前囟后體感運動皮層區(qū)域的Cdh1 mRNA的表達均高于對照組（P<0.05），注射藥物后C組Cdh1 mRNA的表達低于A組及B組（P<0．05）