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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
隨著城市化和工業(yè)化程度的不斷提高,噪聲對(duì)人體的危害日趨增大,長(zhǎng)期接觸噪聲可以對(duì)人體許多系統(tǒng)產(chǎn)生不良影響,尤以聽覺(jué)器官損害最為突出。大量研究顯示,內(nèi)耳微循環(huán)障礙,是噪聲導(dǎo)致耳聾的主要因素。因此,對(duì)耳蝸微循環(huán)的研究一直是耳科界關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。近年來(lái),硫化氫(H2S)等氣體信號(hào)分子成為改善血管微循環(huán)障礙的重要研究方向。基于內(nèi)源性的H2S的生理特性及血管效應(yīng),以及噪聲性聽力損傷過(guò)程中耳蝸血管微循環(huán)障礙的理論,我們從H2S在大鼠
2、耳蝸的分布及調(diào)節(jié)功能入手,觀察了胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)在大鼠耳蝸的分布及在噪聲刺激后的表達(dá)變化,為進(jìn)一步探討硫化氫在內(nèi)耳微循環(huán)中的作用、防治噪聲性耳聾方面提供實(shí)驗(yàn)思路和依據(jù),為預(yù)防和治療與微循環(huán)障礙相關(guān)的內(nèi)耳疾病開辟新的途徑。
方法:
通過(guò)免疫組織化學(xué)及免疫熒光染色技術(shù),觀察CSE在正常成年SD大鼠耳蝸內(nèi)的分布及定位。噪聲暴露采用32只SD大鼠,隨機(jī)分成4組:正常對(duì)照
3、組、1天組、1周組、3周組,后3組分別暴露于110dBSPL寬帶白噪聲中。噪聲暴露后采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)大鼠接受強(qiáng)噪聲刺激前后CSEmRNA在耳蝸內(nèi)的表達(dá)變化。
結(jié)果:
免疫組織化學(xué)及免疫熒光顯示CSE主要表達(dá)在大鼠耳蝸的血管紋以及耳蝸微小血管處;在耳蝸內(nèi)外毛細(xì)胞,各類支持細(xì)胞,蓋膜、蝸神經(jīng)節(jié)處未見(jiàn)明顯表達(dá)。RT-PCR結(jié)果顯示隨著噪聲刺激時(shí)間的延長(zhǎng),CSE在mRNA水平的表達(dá)呈先增長(zhǎng)后下降
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