BMP2在C2C12細(xì)胞系中對MEF1調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)利用HEF1在鼠內(nèi)的同源基因MEF1作為觀測指標(biāo),認(rèn)識BMP2和MEF1之間的關(guān)系,為進(jìn)一步了解HEF1在骨形成過程中的作用提供一個簡化的研究模型.該論文進(jìn)行了以下工作:1.構(gòu)建MEF1探針質(zhì)粒.根據(jù)GenBank中提供的MEF1基因序列設(shè)計(jì)探針引物.從正常小鼠的脾組織中得到mRNA,利用RT-PCR,得到探針,連接到載體中,測序證實(shí)得到序列正確的探針.2.Northern雜交檢測MEF1在C2C12細(xì)胞系中的表達(dá)水平變化.●培養(yǎng)

2、經(jīng)過BMP2刺激的C2C12細(xì)胞.用適量BMP2進(jìn)行處理.分別在0時段,3小時,12小時,48小時提取細(xì)胞RNA.●利用提取的RNA制備Northern雜效用尼龍膜.用[α-<'32>P]dCTP標(biāo)記的探針DNA與轉(zhuǎn)移膜上的RNA進(jìn)行雜交分析.結(jié)果證明在BMP2的刺激下,C2C12細(xì)胞系中MEF1的表達(dá)有了升高.總之,利用分子生物學(xué)技術(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),對MEF1在成骨細(xì)胞分化過程中的變化有了一個初步的判定.為將來進(jìn)一步研究MEF1在成骨