2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:干眼是指由于淚液分泌減少或過度蒸發(fā)導致淚膜異常的一種常見疾病。淚膜隨著水分的丟失變的不穩(wěn)定,眼表亦隨之逐漸退化。干眼發(fā)病率較高,成年人中10-15%患有此病,隨著社會老齡化、角膜接觸鏡的使用以及微機的普及等,其發(fā)病率越來越高。干眼的臨床癥狀主要表現(xiàn)為干澀、眼紅、異物感或磨砂樣感、癢感、燒灼感、流淚、粘性分泌物及視力模糊等,常年累月的不適降低了患者的生活質(zhì)量。目前干眼的治療主要是局部滴用人工淚液改善癥狀,必要時加用抗感染藥物,但人工

2、淚液必須頻繁點眼方可奏效。隨著研究的深入,逐漸認識到頻繁應用的滴眼液中所含氯化苯甲羥胺等防腐劑對眼表上皮有毒性作用,從而限制了這些藥物的頻繁和長期使用。據(jù)文獻報道干眼的發(fā)生與機體免疫有關,環(huán)孢霉素A是一種免疫抑制劑,可刺激T細胞活性、減少許多炎癥因子的產(chǎn)生、降低結膜炎性因子白細胞介素-6的水平,從而改善干眼癥狀。本實驗對干眼兔局部滴用環(huán)孢霉素A進行治療,觀察其對實驗性干眼的療效及對角膜上皮細胞凋亡和相關基因表達的影響,旨在找出滴眼次數(shù)少

3、、毒副作用小且能改善癥狀的治療干眼藥物,為臨床治療干眼提供依據(jù)。 方法:1本實驗采用健康成年新西蘭大白兔22只(河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院實驗動物中心),體重2.5±0.5kg,雌雄不分,隨機分為4組,分別為正常組(正常對照組)、治療組(干眼造模后點環(huán)孢霉素A治療)、對照組(干眼造模后點蓖麻油)和干眼組(干眼造模后不作任何干預)。正常組6只兔12眼,干眼組4只8眼,其余12只兔右側(cè)12眼為治療組,左側(cè)12眼為對照組。對各組兔雙眼行淚膜

4、破裂時間(tearbreakuptime,BUT)、淚液分泌實驗(schirmerⅠ,SIt)檢查。 2干眼模型制作:治療組、對照組和干眼組雙眼手術摘取淚腺、哈氏腺和瞬膜,于手術后每周分別查SIt、BUT,根據(jù)診斷標準第5周末確診為干眼。 3自術后第6周開始點眼,治療組予以2%環(huán)孢霉素A點眼,3次/日、2滴/次,共點6周,對照組予以蓖麻油點眼,用法同治療組。點眼后2、4、6周查SIt、BUT并與正常組及干眼組做比較。

5、 4病理取材:治療后第6周處死實驗動物,取角膜、鼻側(cè)球結膜,4%多聚甲醛固定,石蠟包埋,制片備用。5TUNEL試劑盒檢測干眼組、對照組、治療組和正常組角膜上皮細胞凋亡數(shù)量,計算每高倍視野下(400倍)凋亡細胞數(shù),計算平均捌亡細胞數(shù)。 6免疫組織化學檢查:檢測各組角膜上皮細胞Fas/FasL的表達,并分析其表達的高低與細胞捌亡的相關性。 7結膜組織制成切片后行PAS染色,觀察治療前后杯狀細胞的變化。 8采用SP

6、SS11.5軟件包進行統(tǒng)計學分析。結果:1淚腺摘除術前治療組、對照組、干眼組和正常組各組間SIt和BUT檢查結果與正常相比差異無顯著性(p>0.05),術后SIt和BUT隨時間延長數(shù)值逐漸下降,每次檢測結果與正常組相比均有顯著差異,但1-4周末未達到干眼診斷標準,直到第5周時各項指標符合干眼診斷標準 2治療后2周治療組、對照組和干眼組SIt和BUT檢查結果兩兩比較統(tǒng)計學分析差異無顯著性(p>0.05);治療后4周和6周SIt和B

7、UT檢查結果正常組>治療組>對照組>干眼組,經(jīng)統(tǒng)計學分析均有顯著性差異(p<0.01)。 3裂隙燈檢查可見干眼組兔角膜干燥少光澤,熒光素染色見散在點片狀著色,結膜和瞼緣充血,有多量異常分泌物,炎癥明顯。治療后結膜和瞼緣充血減輕,治療組熒光素染色無著色,對照組見散在點狀著色. 4TUNEL試劑盒檢測干眼組、對照組和治療組角膜上皮中捌亡細胞數(shù)分別為(6.21±2.12)、(3.42±1.32)和(1.27±0.14)個/高倍

8、視野,凋亡細胞核呈棕黃色,三組數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學檢驗差異有顯著性(p<0.01)。 5免疫組織化學檢查捌亡相關基因蛋白Fas/FasL主要表達于細胞膜和細胞漿,陽性反應物呈棕黃色,陽性表達細胞的數(shù)量干眼組>對照組>治療組>正常組,經(jīng)統(tǒng)計學分析各組間差異有顯著性. 6組織病理學觀察干眼組結膜杯狀細胞數(shù)量減少,上皮細胞排列不規(guī)則,可見大量淋巴細胞浸潤;角膜上皮變薄,上皮細胞不完整,細胞核變?。恢委熃M結膜杯狀細胞數(shù)量較干眼組明顯增加

9、,但仍較正常組少,細胞排列較規(guī)則,淋巴細胞浸潤減少,角膜上皮細胞層變厚,接近正常,治療組明顯好于對照組,對照組略好于干眼組,但較治療組差。 結論:本實驗通過摘取淚腺獲取水液缺乏型干眼兔模型,治療組進行局部環(huán)孢霉素A治療,因環(huán)孢霉素A為脂溶性,實驗和臨床中常選用蓖麻油為溶劑,故對照組選用蓖麻油進行局部治療,治療6周后,綜合各項指標,并進行病理學、免疫組化學研究,F(xiàn)as/FasL等相關基因蛋白的表達進行檢測,得出如下結論:

10、1環(huán)孢霉素能夠減輕結膜炎癥,恢復或部分恢復杯狀細胞功能從而增加淚液,對干眼病有潛在的治療作用。 2干眼兔經(jīng)用環(huán)孢霉素A點眼后,BUT時間延長、SIt增加的程度明顯優(yōu)于單純使用蓖麻油,證實環(huán)孢霉素A除了對眼表有潤滑作用外,確有治療作用。 3環(huán)孢霉素A能減緩角膜上皮的捌亡。 4兔干眼模型角膜上皮Fas/FasL陽性表達細胞數(shù)與凋亡數(shù)間呈正相關,推測干眼角膜上皮細胞的凋亡很可能是由Fas/FasL途徑介導的。

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