痹祺膠囊多指標含量測定和君藥使藥化學(xué)指紋及體外代謝指紋圖譜初步分析.pdf

1、“痹祺膠囊”由馬錢子、丹參、川芎、甘草等組成，是天津達仁堂達二藥業(yè)有限公司研制生產(chǎn)的中藥制劑，具有益氣養(yǎng)血、活血通絡(luò)、祛風(fēng)止痛的功效，用于腰肌勞損、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等癥。本文針對中藥制劑多成分的特點，建立了多指標定量分析的HPLC方法，并科學(xué)地應(yīng)用代謝組學(xué)和生物信息學(xué)方法分析了方劑中君藥和使藥的化學(xué)指紋和代謝指紋圖譜。
　　 建立了同時測定痹祺膠囊中馬錢子堿、士的寧和丹酚酸B含量的方法。采用反相高效液相色譜法，色譜柱：Inertsi

2、lODS-3(4.6mm×250mm，5μm)；流動相：乙腈：緩沖液=22:78(緩沖液為1000mL水中分別含10mmol/L的己烷磺酸鈉和磷酸二氫鉀，磷酸調(diào)pH=2.86)；流速：1.0mL/min；檢測波長：254nm；柱溫：25℃。馬錢子堿、士的寧和丹酚酸B的線性范圍分別為2.68～32.1mg/L(r=0.9998)，2.61～31.32mg/L(r=0.9999)，12.62～151.5mg/L(r=0.9991)；平均加樣

3、回收率(n=6)分別為99.3％，95.6％，98.9％；RSD分別為2.30％，3.68％，1.82％。該法簡便快捷，結(jié)果準確，可用于痹祺膠囊的質(zhì)量控制。
　　 將馬錢子提取液分別與大鼠腸道菌和肝微粒體進行體外溫孵，用乙腈和甲醇的混合物終止反應(yīng)，HPLC測定溫孵后樣品，并與提取液相對比，結(jié)果表明：在馬錢子提取液中主要有3個色譜峰，分別為峰1、峰2(士的寧)和峰3(馬錢子堿)；經(jīng)腸道菌中溫孵24h后，峰1有20％的代謝，峰2和峰

4、3代謝不明顯；經(jīng)肝微粒體溫孵60min后，峰1沒有顯著變化，峰2和峰3約有30％的代謝，在8min左右出現(xiàn)了2個色譜峰。這說明肝臟是馬錢子的重要解毒代謝場所。
　　 將甘草提取液分別與大鼠腸道菌和肝微粒體進行體外溫孵，用乙腈和甲醇的混合物終止反應(yīng)，HPLC測定溫孵后樣品，并與提取液相對比，結(jié)果表明：在甘草提取液中主要有4個色譜峰，分別為峰1、峰2(甘草苷)、峰3和峰4(甘草酸)；經(jīng)腸道菌中溫孵24h后，峰1和峰2消失，峰3和峰4