醛固酮瘤和正常腎上腺中長(zhǎng)鏈非編碼RNA表達(dá)譜差異的研究.pdf

1、研究背景:原發(fā)性醛固酮增多癥（簡(jiǎn)稱原醛）是內(nèi)分泌相關(guān)性高血壓最常見的病因。目前發(fā)現(xiàn)原醛的亞型有很多種，其中產(chǎn)醛固酮瘤最為常見，約占原醛患者的60％。然而，其腎上腺皮質(zhì)腫瘤的發(fā)生和醛固酮過度分泌的分子機(jī)制至今不明。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一類長(zhǎng)度大于200bp，可轉(zhuǎn)錄但不具有蛋白編碼功能的RNA成分。它們具有各種生物學(xué)功能，最近發(fā)現(xiàn)其異常表達(dá)可能與多種疾病的發(fā)生有關(guān)。
　　研究目的:

2、觀察醛固酮瘤與正常腎上腺組織中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的差異并對(duì)差異表達(dá)的lncRNA進(jìn)行初步的信息學(xué)分析，為進(jìn)一步探討其調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ)。研究對(duì)象和方法:分別提取6例醛固酮瘤和6例正常腎上腺組織的RNA，分離純化后反轉(zhuǎn)錄成cRNA，生成具有熒光標(biāo)記的cRNA產(chǎn)物后，利用lncRNA芯片技術(shù)檢測(cè)醛固酮瘤組和正常腎上腺組中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的差異。對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行處理、均一化后篩選出有差異表達(dá)的lncRNA，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)和生物信息學(xué)分析。然后收集1

3、0例醛固酮瘤組織和9例正常腎上腺組織，從芯片篩選出的差異表達(dá)lncRNA中隨機(jī)選取4條，用real-time PCR技術(shù)對(duì)芯片結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。
　　研究結(jié)果:lncRNA芯片一共檢測(cè)出16160條lncRNA。將醛固酮瘤組與正常對(duì)照組進(jìn)行比較:其中變化在1.5倍以上且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)的認(rèn)為是表達(dá)有差異的lncRNA。與正常對(duì)照組相比，醛固酮瘤組中表達(dá)有差異的lncRNA一共檢測(cè)到1809條，其中1181條表達(dá)上調(diào)，

4、628條表達(dá)下調(diào)。Real-timePCR結(jié)果顯示隨機(jī)選取的四條lncRNA中，有兩條lncRNA表達(dá)有明顯差異，另外兩條的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　研究結(jié)論:本次研究首次通過芯片技術(shù)對(duì)醛固酮瘤中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的變化進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示與正常對(duì)照組相比，醛固酮瘤存在lncRNA的表達(dá)改變。驗(yàn)證結(jié)果提示應(yīng)用芯片結(jié)果仍需要對(duì)有表達(dá)改變的lncRNA在擴(kuò)大的臨床樣本中進(jìn)一步證實(shí)。這些差異表達(dá)的lncRNA可能為進(jìn)一步闡明醛固酮瘤發(fā)