microRNA-210在妊娠高血壓疾病中的診斷應(yīng)用及調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文micrNA210在妊娠高血壓疾病中的診斷應(yīng)用及調(diào)控機(jī)制研究姓名：費明鈺申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：孫樹漢20100501第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要婦外周血，根據(jù)臨床上對妊高癥發(fā)病程度將這些孕婦分為正常組、妊娠高血壓組(妊娠20周后血壓升高且無蛋白尿)、輕度先兆子癇組(收縮壓140millHg或舒張壓≥90mmHg，24小時蛋白尿300mg、定性l)，及重度先兆子癇組(收縮壓160mmHg或舒張壓之

2、100mmHg，24小時蛋白尿芝20g、定性2)。通過實時定量PCR方法檢測血漿中miR210的表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)患有妊娠高血壓疾病的孕婦其血漿中miR210的含量明顯高于正常孕婦胎盤中miR210的表達(dá)量，并且重度先兆子癇患者血漿中miR210的含量升高更為顯著。由于妊娠早期胎盤需氧量較大，供氧量對于胚胎和胎盤的發(fā)育相當(dāng)重要，因此胎盤在形成的過程中即處于一個相對低氧的環(huán)境中，而胎盤的缺血缺氧可能是子癇前期的關(guān)鍵因素，因此，氧分壓在滋養(yǎng)細(xì)胞

3、分化過程中是一個關(guān)鍵的調(diào)節(jié)因素。為了檢測mir210在缺氧環(huán)境中的表達(dá)水平，我們將JAR細(xì)胞放置于低氧環(huán)境中，經(jīng)實時定量PCR檢測后發(fā)現(xiàn)，到48h時，缺氧環(huán)境中miR210的表達(dá)量較正常氧環(huán)境中的對照組升高了近13倍并且其表達(dá)量持續(xù)增加至72h，由此可見，miR210的表達(dá)量受缺氧誘導(dǎo)明顯。妊娠早期滋養(yǎng)層細(xì)胞分化形成游離絨毛和固定絨毛，前者直接浸泡在絨毛間隙中，與母血進(jìn)行營養(yǎng)物質(zhì)及氣體交換，后者增生并突破子宮內(nèi)膜的基底層，成為間質(zhì)滋養(yǎng)細(xì)

4、胞并浸潤蛻膜、肌層和血管。間質(zhì)滋養(yǎng)細(xì)胞沿螺旋小動脈逆行浸潤逐步取代血管內(nèi)皮細(xì)胞深入血管壁，降解血管平滑肌及彈力纖維，使血管腔擴(kuò)大，血流阻力下降，血流量增大，這一過程稱為血管重鑄。然而由于妊娠期滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤能力不足而導(dǎo)致子宮螺旋小動脈生理重鑄的過程發(fā)生障礙，則稱為胎盤“淺著床“，導(dǎo)致滋養(yǎng)層細(xì)胞分化浸潤能力受損，使胎盤血管網(wǎng)絡(luò)生長發(fā)育不良，從而造成滋養(yǎng)細(xì)胞缺血缺氧的病理性改變。為了進(jìn)一步解釋miR210在妊高癥患者體內(nèi)升高與妊高癥發(fā)病機(jī)制之

5、間的相關(guān)性，我們通過體外功能實驗對它調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞侵襲的能力進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示，升高的miR210促進(jìn)細(xì)胞凋亡，并且顯著抑制細(xì)胞的侵襲和遷移。在之后的研究中，我們通過生物信息學(xué)和實驗手段證實HOXA9及EFNA3是miR210的靶基因，不僅如此，這兩個靶基因的表達(dá)水平在妊娠高血壓疾病患者病例樣本及缺氧的絨毛膜癌細(xì)胞中均呈現(xiàn)降低的趨勢。這一研究結(jié)果說明miR210／EFNA3及miR210／HOXA9通路在妊高癥發(fā)生發(fā)展中的重要作用