細胞芯片法在急性白血病骨髓樣本免疫分型中的應用.pdf

1、目的
　　白血病是導致惡性腫瘤死亡的主要疾病之一，其中急性白血病占35歲以下成人腫瘤死亡首位。據(jù)統(tǒng)計，在發(fā)病率最高的西歐、北美白種人中白血病年死亡率為3.2～7.4/10萬人口;發(fā)病率低的亞洲、南美洲地區(qū)年死亡率為2.8～4.5/10萬人口。我國年發(fā)病率與死亡率為2～4/10萬人口，與歐美等國的類型分布有較明顯的差別。在白血病的診療中，對白血病進行分型成為關鍵，不同類型的白血病其診療方案不同，療效及預后也不同。80年代以前白血病的

2、分型主要參照FAB分型標準，采用細胞形態(tài)學和組化染色等手段。隨著CD的抗體不斷被國際協(xié)作組確認，MICM分型已成為當今白血病診斷分型、預后判斷和殘留病變檢測的標準。目前臨床上進行白血病的免疫分型主要是應用流式細胞術及免疫組化技術，其分型受到標本量、價格、程序等的限制，而且一次實驗只能分析1～4個表面抗原，漏掉了大量監(jiān)測機體免疫狀態(tài)的表面抗原指標。隨著生物芯片技術的發(fā)展，學者們開始應用這種高通量、并行性、集成化的技術平臺進行白血病的免疫分

3、型研究。本實驗在前人的基礎上對應用于急性白血病免疫分型診斷的細胞芯片進行深入研究，對急性白血病患者的骨髓樣本進行免疫分型，從而快速診斷白血病的類型。實現(xiàn)為臨床診斷提供快速、簡便、完整的免疫學資料。
　　方法
　　1.將單克隆抗體點在醛基玻片上，細胞懸液滴于細胞芯片，那些有相應CD抗原的細胞只能與相應的單克隆抗體的點結(jié)合，進行Wright's染色。
　　2.對65例臨床白血病骨髓標本進行分型并驗證結(jié)果。
　　結(jié)果<

4、br>　　1.65例臨床標本的細胞芯片免疫學分型結(jié)果:52例AML(ANLL):48例表達CD13(92.31％)，33例表達CD33(63.46％)，18例表達CD15，42例表達HLA-DR;8例B-ALL:8例表達CD79(100％)，7例表達CD19(87.5％)和HLA-DR，7例表達CD10(87.5％)，5例表達CD20(62.5％)，5例表達CD22(62.5％)，;5例T-ALL:5例表達CD3(100％)，5例表達C

5、D7(100％)，4例表達CD2(80％)。
　　2.流式細胞儀對65例臨床樣本的免疫分型結(jié)果:急性髓細胞白血病主要表達CD13(94.23％)、CD33(69.23％);B系ALL高表達CD79(100％)，CD19(87.5％)，CD10(75.0％);T系ALL中CD2，CD3，CD7均為100％表達。
　　3.經(jīng)Wright's染色后，顯微鏡下進行白血病細胞形態(tài)學分析，65例臨床標本的FAB分型結(jié)果:M14例，M21