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1、目的:該研究旨在于健康S-D大鼠玻璃體腔注射一定量的外源性晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs),觀察AGEs對視網(wǎng)膜神經(jīng)成份的損傷作用.方法:1、AGE-BSA的制備:牛血清白蛋白(BSA)、D-葡萄糖及苯甲基磺酰氟(PMSF)共同溶解于0.2mol/L磷酸緩沖液中37℃培養(yǎng)箱內(nèi)孵化60天.非糖基化BSA的制備:除不加葡萄糖外,其他材料及方法均同上.2、36只大鼠的右眼玻璃體腔注射0.25 μ g AGE-BSA做為實驗組,左眼玻璃體腔注射同
2、樣劑量的非糖基化BSA做為對照組.1只正常大鼠做為膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)的正常對照.3、分別在玻璃體腔注射后第3、5、7天處死S-D大鼠,行視網(wǎng)膜鋪片TUNEL法觀察神經(jīng)節(jié)細胞凋亡;在玻璃體腔注射后第1、3、5、7、10、14天處死S-D大鼠,行冰凍切片GFAP免疫組化觀察Muller細胞膠質(zhì)化反應(yīng)情況、HE染色光鏡下視網(wǎng)膜形態(tài)學觀察及透射電鏡下視網(wǎng)膜超微結(jié)構(gòu)觀察.4、實驗組在玻璃體腔注射AGE-BSA后第14天,隨機選取3眼行
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