氯硝柳胺新劑型的研究.pdf

1、日本血吸蟲(chóng)病是一種嚴(yán)重危害我國(guó)人民身體健康的重大傳染性疾病，是我國(guó)政府“十一五”期間力求控制的4大傳染性疾病之一。釘螺(Oncomelaniasnail)是日本血吸蟲(chóng)唯一中間宿主，消滅釘螺可阻斷血吸蟲(chóng)病的傳播。化學(xué)藥物滅螺是控制釘螺最有效的措施之一，氯硝柳胺(Niclosamide)因其具有高效低毒對(duì)環(huán)境污染少等顯著優(yōu)點(diǎn)，是目前國(guó)內(nèi)唯一允許使用的化學(xué)滅螺藥，這也是WHO唯一推薦使用的滅螺藥。但由于氯硝柳胺難溶于水，使其現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用受到限制。

2、為提高該化合物的溶解性，使之能夠在現(xiàn)場(chǎng)得到應(yīng)用，將其制成氯硝柳胺乙醇胺鹽(Bayluscide，貝螺殺)，雖其比氯硝柳胺溶解性略有改善，但仍不能滿足于現(xiàn)場(chǎng)的需要。此后又將氯硝柳胺乙醇胺鹽制成可濕性粉劑，一定程度上提高了氯硝柳胺乙醇胺鹽的溶解性，使其在現(xiàn)場(chǎng)得以應(yīng)用，但還存在明顯的缺陷，如在使用過(guò)程中需不斷地?cái)嚢璨拍芊稚?，易結(jié)成團(tuán)塊堵塞噴藥器具等。貯存后，結(jié)塊更明顯，懸浮率下降，使得藥物分散不均勻，導(dǎo)致殺螺效果下降。 自發(fā)現(xiàn)氯硝柳胺

3、具有殺螺作用40多年來(lái)，如何提高氯硝柳胺溶解性，使得其能適合現(xiàn)場(chǎng)需要，在滅螺中發(fā)揮更大作用，一直是困擾血吸蟲(chóng)病防治科研的難題。本研究希望通過(guò)氯硝柳胺殺螺劑型的改進(jìn)，研制懸浮劑、復(fù)方懸浮劑和納米劑，獲得高效、低毒、價(jià)廉和使用方便的新劑型，為血吸蟲(chóng)病防治和“十一五”規(guī)劃任務(wù)的完成服務(wù)。 1.氯硝柳胺懸浮劑的研究將難溶于水的氯硝柳胺原藥，與潤(rùn)濕劑、分散劑、粘度調(diào)節(jié)劑、防凍劑、防腐劑和消泡劑等按比例混合后，經(jīng)濕性研磨至藥物顆粒粒徑0.2

4、-20μm，制成一種性能穩(wěn)定、水中分散均勻的高分散懸浮體系--懸浮劑(SuspensionConcentrateofNiclosamide，SCN)，其中氯硝柳胺含量為25﹪，分散性、流動(dòng)性、熱貯冷藏穩(wěn)定性、懸浮率等指標(biāo)均達(dá)到同類制劑的國(guó)家技術(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并可以任意比例與水均勻混合，解決了固體不溶性藥物氯硝柳胺使用不方便的難題。 25℃實(shí)驗(yàn)室浸殺釘螺試驗(yàn)：氯硝柳胺懸浮劑(SCN)有效成份濃度0.25mg/L浸泡釘螺24h，釘螺死亡

5、率為100﹪，SCN浸殺釘螺24h的LG50為0.0474mg/L，而氯硝柳胺乙醇胺鹽可濕性粉劑(WPN)的LG0為0.0947mg/L。SCN的48h和72h殺螺效果同樣高于WPN，SCN浸殺釘螺幼螺、螺卵的效果也高于WPN，在相同的劑量下，SCN殺滅釘螺的效果為WPN的2倍。 25℃實(shí)驗(yàn)室噴灑殺螺試驗(yàn)：以SCN2.0g/(L·m2)噴灑(有效成份含量為0.5g/m2)，泥盤(pán)含水量＞10﹪，各組釘螺死亡率均為100﹪。以WPN

6、2.0g/(L·m2)噴灑(有效成份含量為1.0g/m2)，釘螺死亡率則為60﹪-100﹪，均低于對(duì)應(yīng)的SCN各濃度組。SCN的噴灑殺螺效果高于WPN。 現(xiàn)場(chǎng)浸殺釘螺試驗(yàn)：SCN2.0mg/L(有效成份濃度0.5mg/L)現(xiàn)場(chǎng)浸殺1d、2d、3d，螺袋內(nèi)釘螺死亡率分別為72.0﹪、92.0﹪和100﹪，溝內(nèi)泥土中釘螺死亡率分別為88.5﹪、95.1﹪和99.3﹪；WPN2.0mg/L(有效成份濃度1.0mg/L)螺袋內(nèi)釘螺死亡率

7、56.0﹪、82.0﹪和98.0﹪，溝內(nèi)泥土中釘螺死亡率80.0﹪、91.9﹪和97.8﹪。SCN在有效成份濃度低于WPN一半的條件下，其浸殺釘螺效果仍然高于WPN。 現(xiàn)場(chǎng)噴灑殺螺試驗(yàn)：江灘現(xiàn)場(chǎng)噴灑SCN2.0g/(L·m2)(有效成份含量為0.5g/m2)，3d、7d、15d釘螺死亡率分別為95.77﹪、99.07﹪和97.09﹪；與WPN2.0g/(L·m2)噴灑(有效成份含量為1.0g/m2)殺螺效果相近。多地區(qū)試驗(yàn)結(jié)果均

8、顯示，在同一地點(diǎn)相同的噴灑時(shí)間，SCN用藥量為WPN的一半時(shí)，SCN的殺螺效果仍高于WPN的殺螺效果。 毒性試驗(yàn)：按照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB15670-1995，采用農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗(yàn)方法進(jìn)行大鼠急性經(jīng)口(LD50)、急性經(jīng)皮(LD50)、急性吸入(LG50)毒性試驗(yàn)和眼、皮膚剌激試驗(yàn)。結(jié)果SCN對(duì)大鼠急性經(jīng)口、經(jīng)皮、經(jīng)呼吸道試驗(yàn)屬微毒類農(nóng)藥；對(duì)眼、皮膚無(wú)剌激性。SCN對(duì)魚(yú)的急性毒性略低于氯硝柳胺純品的毒性，但顯著低于氯硝柳

9、胺乙醇胺鹽純品及其50﹪的可濕性粉劑對(duì)魚(yú)的毒性。 SCN的生產(chǎn)是以水為連續(xù)相的分散體系，既節(jié)省了大量的有機(jī)溶劑，降低成本，又減少了有機(jī)溶劑對(duì)操作者的刺激和對(duì)環(huán)境的污染，生產(chǎn)過(guò)程中無(wú)三廢產(chǎn)生，十分安全。SCN在與WPN相同的殺螺劑量下，SCN的殺螺效果是WPN的2倍，并降低了滅螺成本，減少了對(duì)環(huán)境污染的負(fù)荷，在滅螺劑量下對(duì)魚(yú)的毒性顯著低于WPN，是符合WHO評(píng)價(jià)殺螺劑標(biāo)準(zhǔn)(高效、低毒、價(jià)廉、使用方便)的創(chuàng)新劑型，是一種適合于血吸蟲(chóng)

10、病流行區(qū)用于殺滅釘螺的新制劑，值得在血吸蟲(chóng)病流行區(qū)推廣使用。 2.氯硝柳胺復(fù)方懸浮劑的研究將難溶于水的氯硝柳胺原藥和增效劑氯辛硫磷，與潤(rùn)濕劑、分散劑、粘度調(diào)節(jié)劑、防凍劑、防腐劑和消泡劑等按比例混合后，經(jīng)濕性研磨至藥物顆粒粒徑0.2-20μm，研制成了20﹪氯硝柳胺復(fù)方增效懸浮劑(Co-SCN)，該制劑為灰白色流動(dòng)性液體，與水可以任意比例混合，分散性好。 25℃實(shí)驗(yàn)室Co-SCN浸殺釘螺24h、48h和72h的LC50分別

11、為0.0625mg/L、0.0625mg/L和0.0508mg/L；而WPN浸殺釘螺24h、48h和72h的LG50分別為0.1250mg/L、0.1088mg/L和0.0884mg/L。復(fù)方劑的殺螺增效比分別為2、1.74和1.74。 現(xiàn)場(chǎng)用20﹪氯硝柳胺復(fù)方懸浮劑1.0mg/L(有效成份濃度0.2mg/L)浸殺和1.0g/(L·m2)噴灑(有效成份含量為0.2g/m2)，其殺螺效果可達(dá)到50﹪氯硝柳胺乙醇胺鹽可濕性粉劑2.0

12、mg/L(有效成份濃度1.0mg/L)浸殺和2.0g/(L·m2)噴灑(有效成份含量為1.0g/m2)的滅螺效果。表明20﹪氯硝柳胺復(fù)方懸浮劑較50﹪氯硝柳胺乙醇胺鹽可濕性粉劑有更好的殺螺效果，有較高的增效殺螺作用。 毒性試驗(yàn)：通過(guò)大鼠急性經(jīng)口(LD50)、急性經(jīng)皮(LD50)、急性吸入(LC50)毒性試驗(yàn)和眼、皮膚剌激和致敏試驗(yàn)。結(jié)果顯示SCN對(duì)大鼠急性經(jīng)口、經(jīng)皮、經(jīng)呼吸道試驗(yàn)屬微毒類農(nóng)藥；對(duì)眼、皮膚無(wú)剌激性，無(wú)致敏性反應(yīng)；C

13、o-SCN對(duì)魚(yú)的急性毒性低于WPN的毒性。 增效殺螺機(jī)制研究顯示：氯辛硫磷作用釘螺后，使釘螺體內(nèi)各部位的糖元(PAS)反應(yīng)、膽堿酯酶(CHE)、一氧化氮合成酶(NOS)活性均降低，尤其神經(jīng)節(jié)和足肌中的膽堿酯酶(CHE)、一氧化氮合酶(NOS)活性顯著降低，影響釘螺神經(jīng)活動(dòng)，導(dǎo)致釘螺興奮受到抑制，肌肉組織失去張力，釘螺軟體伸出，缺乏對(duì)外界刺激的逃避反應(yīng)，增加釘螺與氯硝柳胺接觸的親酯表面，導(dǎo)致氯硝柳胺的吸收增加，毒性作用增強(qiáng)，加劇了

14、病理?yè)p傷，因而，氯辛硫磷對(duì)氯硝柳胺有增效殺螺作用。 3.氯硝柳胺納米劑的研究用行星式球磨機(jī)對(duì)氯硝柳胺晶體進(jìn)行物理分散，同時(shí)選用適當(dāng)?shù)闹鷦?，得到了穩(wěn)定的氯硝柳胺納米劑。納米顆粒的獲得需要長(zhǎng)時(shí)間、高強(qiáng)度、大球料比的球磨條件，大球料比和高轉(zhuǎn)速有利于集中球磨的強(qiáng)度。當(dāng)球磨機(jī)轉(zhuǎn)速大于500r/min，球料比大于20∶1時(shí)，球磨20小時(shí)即可得到D50為455nm的顆粒，粒徑小于1μm的顆粒達(dá)到90﹪。用1mm的氧化鋯球較長(zhǎng)時(shí)間研磨，可得到D

15、50為71nm的氯硝柳胺納米粒子劑。所以，通過(guò)對(duì)球磨條件的選擇，使用合適的助劑，可實(shí)現(xiàn)氯硝柳胺制劑的納米化，得到顆粒大小在80nm左右的氯硝柳胺納米劑。25℃實(shí)驗(yàn)室氯硝柳胺納米劑浸殺釘螺成螺24h和48h的半數(shù)致死濃度(LC50)分別為0.0770mg/L和0.0718mg/L；而WPN浸殺釘螺24h和48h的LC50分別為0.1250mg/L和0.1088mg/L。納米劑(25﹪)在現(xiàn)場(chǎng)使用1.0mg/L或1.0g/(L·m2)(即有

16、效劑量為0.25mg/L或0.25g/m2)，殺螺效果可達(dá)到50﹪氯硝柳胺乙醇胺鹽可濕性粉劑2.0mg/L或2.0g/(L·m2)(即有效劑量1.0mg/L或1.0g/m2)時(shí)的效果。氯硝柳胺納米劑較目前常用的50﹪的氯硝柳胺可濕性粉劑的殺螺效果明顯提高，在現(xiàn)場(chǎng)殺螺中僅需要使用相當(dāng)于50﹪氯硝柳胺乙醇胺鹽可濕性粉劑中有效劑量的1/4的納米劑即可達(dá)到與其相同的效果。 本研究表明：氯硝柳胺懸浮劑(SCN)生產(chǎn)簡(jiǎn)單、安全，SCN在與W

17、PN相同的殺螺劑量下，SCN的殺螺效果是WPN的2倍，并降低了滅螺成本，減少了對(duì)環(huán)境污染的負(fù)荷，對(duì)魚(yú)的毒性顯著低于WPN，是符合WHO評(píng)價(jià)殺螺劑標(biāo)準(zhǔn)(高效、低毒、價(jià)廉、使用方便)的創(chuàng)新劑型，值得在血吸蟲(chóng)病流行區(qū)推廣使用。復(fù)方懸浮劑(Co-SCN)具有SCN的優(yōu)點(diǎn)，并有增效殺螺作用，可進(jìn)一步降低氯硝柳胺的用量，降低成本，但還需對(duì)不同階段釘螺的殺螺效果及擴(kuò)大現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用進(jìn)行評(píng)價(jià)，此外，由于增效劑的用量還較大，還需調(diào)整配方比例，進(jìn)一步降低使用成本