藥物性肝病動物模型分析.pdf

1、臨床上，藥物引起的肝臟損傷越來越多見，據(jù)資料顯示，目前約有1000多種藥物可以導(dǎo)致肝損傷。在美國，藥物性肝病約占住院肝病患者的2～5％，占成人肝病患者的10％，25％的暴發(fā)性肝衰竭是由藥物引起的。在我國，藥物性肝病所占比例約為急性肝炎住院患者的10％。 在急性藥物性肝損傷中，按其損傷的部位及其病理改變不同，臨床分以下三型：(1)急性肝細(xì)胞型；(2)急性肝內(nèi)淤膽型；(3)混合型。本實驗主要通過使用對乙酰氨基酚和氯丙嗪，分別復(fù)制急性

2、肝細(xì)胞型肝損傷的動物模型和急性肝內(nèi)淤膽型肝損傷的動物模型。通過對這兩種動物模型的肝臟生化、肝臟病理的檢查，探討臨床上藥物引起的急性肝細(xì)胞型肝損傷、急性肝內(nèi)淤膽型肝損傷的特點(diǎn)，為進(jìn)一步進(jìn)行臨床研究提供線索，同時加強(qiáng)臨床醫(yī)師對藥物性肝病的認(rèn)識，在臨床醫(yī)療工作中提高對該病的警惕性，以減少臨床用藥所帶給患者的不良后果。 材料和方法 1.肝損傷動物模型制備 1.1分組60只SD大鼠(體重180-230g)，隨機(jī)分為A、B、

3、C三組，每組20只，A組為對照組，B組為對乙酰氨基酚組，C組為氯丙嗪組。 1.2處理B組大鼠給予450mg/kg體重的對乙酰氨基酚溶液(用40℃生理鹽水配制)腹腔內(nèi)注射；C組大鼠給予75mg/kg體重的氯丙嗪腹腔內(nèi)注射；A組大鼠給予等量的生理鹽水腹腔內(nèi)注射。給藥24h后采集各大鼠靜脈血，取肝臟標(biāo)本。 2.實驗指標(biāo)檢測 2.1肝臟生化指標(biāo)檢測：給藥24h后采集各大鼠靜脈血，檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AS

4、T)、堿性磷酸酶(ALP)、直接膽紅素(Dbil)、總膽紅素(Tbil)、總膽汁酸(TBA)。R值計算(R=ALT超過正常值的倍數(shù)/ALP超過正常值的倍數(shù))。 2.2肝臟標(biāo)本病理學(xué)觀察：給藥24h后取大鼠肝臟組織，分別行HE染色、硝酸銀染色，光學(xué)顯微鏡下觀察病理改變并照片。另取肝臟標(biāo)本制作電鏡切片，電鏡下觀察肝細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)并照片。 3.實驗數(shù)據(jù)處理實驗測得所有數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來表示，組間比較用t檢驗。計算RB、R

5、C的95％置信區(qū)間。 實驗結(jié)果 1.肝臟生化檢測B組(對乙酰氨基酚組)以AST、ALT升高最為明顯，與A組(對照組)相比較，達(dá)到5倍以上，Tbil、Dbil輕度升高。C組(氯丙嗪組)以ALP、TBA升高為主，AST、ALT升高為正常對照組的3倍以上，Tbil、Dbil輕度升高。 2.R值計算以A組的ALP、ALT平均數(shù)為正常值，計算出RB=6.48±2.37，RC=1.12±1.05，RB的95％置信區(qū)間為(5.

6、37，7.59)；RC的95％置信區(qū)間為(0.63，1.61)。 3.肝臟病理改變對乙酰氨基酚組，輕者僅見點(diǎn)狀壞死或灶性壞死，重者見帶狀或大塊性壞死，伴有網(wǎng)狀支架塌陷，匯管區(qū)和小葉內(nèi)可有炎癥細(xì)胞浸潤、淤膽和Kupffer細(xì)胞增生；氯丙嗪組，偶見點(diǎn)狀壞死，毛細(xì)膽管、肝細(xì)胞和星狀細(xì)胞內(nèi)有膽汁淤積，在小葉中心區(qū)最為顯著，匯管區(qū)有單核、淋巴和中性粒細(xì)胞浸潤，電鏡可見毛細(xì)膽管擴(kuò)張，微絨毛減少、消失或變形。 結(jié)論 1.本實驗

7、利用對乙酰氨基酚和氯丙嗪，分別復(fù)制急性肝細(xì)胞型肝損傷動物模型和急性膽汁淤積型肝損傷動物模型基本成功。 2.藥物性肝病肝臟生化改變：急性肝細(xì)胞型藥物性肝損傷，臨床上多以AST，ALT升高為主；急性膽汁淤積型肝損傷以ALP、TBA升高為主。肝臟生化檢測意義：定義肝損傷，判斷預(yù)后。 3.R值主要用于急性藥物性肝病臨床分類，本研究所得出的B組、C組R值95％置信區(qū)間與文獻(xiàn)報導(dǎo)相一致。 4.藥物性肝病肝臟病理改變：急性肝細(xì)