三株不同海洋環(huán)境來源微生物胞外多糖的結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、海洋微生物是重要的海洋生物資源。由于海洋微生物生活在海洋高鹽、高壓、低溫缺氧、光照不足和寡營養(yǎng)的水體環(huán)境中，使得海洋微生物多糖在結(jié)構(gòu)和活性方面與來源于陸生生物中的多糖有著顯著的差異。本文從三株來源不同的海洋微生物的發(fā)酵液中提取得到粗品胞外多糖，再經(jīng)分離純化得到純品多糖，并對得到的多糖組分進(jìn)行化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)的研究。研究結(jié)果如下:
　　1.從西沙海綿共附生真菌Aspergillus versicolor.fj-112的發(fā)酵液中提取得到

2、胞外多糖粗品LC，經(jīng)Q-Sepharose Fast Flow陰離子交換柱分級得到多糖LC-1和LC-2，利用SephacrylS-100凝膠滲透層析柱對LC-1和LC-2進(jìn)一步的分離純化得到兩個多糖組分LC-1-p和LC-2-p。高效凝膠滲透色譜分析表明，LC-1-p呈單一對稱峰，純度高，分子量為5 kDa。PMP柱前衍生高效液相色譜分析表明，LC-1-p是由Man和Gal組成，比例為14∶2。經(jīng)紅外光譜、甲基化分析和核磁共振波譜分析

3、表明，LC-1-p的連接方式以→2)Manp(1→為主，還含有→1)Galp(4→、→1)Manp(6→和→2，3)Manp(1→連接方式，說明LC-1-p是一種具有分支結(jié)構(gòu)的半乳甘露聚糖。
　　2.從西沙海綿來源的放線菌Streptomyces sp.HDN-10-293的發(fā)酵液中提取得到胞外多糖粗品LD，利用Q-Sepharose Fast Flow離子交換柱層析和SephacrylS-100凝膠滲透柱層析進(jìn)一步的分離純化得到

4、多糖組分LD-2-p。高效凝膠滲透色譜分析表明，LD-2-p呈單一對稱峰，純度高，分子量是13 kDa。PMP柱前衍生高效液相色譜分析表明，LD-2-p主要由Gal組成，含有微量的Glc。經(jīng)紅外光譜、甲基化分析和核磁共振分析表明，該多糖主要連接方式是→3）Gap（1→，還有少量的Galp(1→和→6)Glcp（1→連接方式，說明LD-2-p是一種線性葡萄半乳聚糖。
　　3.印度洋的真菌Aspergillus sp.ZZZ-115的

5、發(fā)酵液，經(jīng)濃縮、透析、醇沉等處理后，得到微生物胞外粗多糖LG，其得率為0.8 g/L。利用Q-Sepharose Fast Flow離子交換柱層析和Sephacryl S-100凝膠滲透柱層析對該多糖進(jìn)一步分離純化得到兩個多糖組分LG-3-D1和LG-3-D2。高效凝膠滲透色譜分析表明，LG-3-D1和LG-3-D2均呈單一對稱峰，純度高，分子量分別為23 kDa和16 kDa。經(jīng)PMP柱前衍生高效液相色譜分析表明，LG-3-D1和LG

6、-3-D2的單糖組成以及摩爾比非常相似，都是由Man和Gal組成，且比例為1.6∶1。經(jīng)紅外光譜和甲基化分析表明，LG-3-D2的連接方式復(fù)雜，其主要連接方式是→2）Manp(1→，其余連接方式有Galp(1→、→4)Galp（1→、→6）Manp(1→和→2，3)Manp(1→，說明該多糖有支鏈結(jié)構(gòu)存在，LG-3-D2是一種具有支鏈的半乳甘露聚糖。
　　本論文為我國“海洋糖庫”的建設(shè)提供了結(jié)構(gòu)新穎的海洋微生物多糖，為海洋微生物多