小刺猴頭菌液體深層發(fā)酵浸膏糖類物質(zhì)藥理學(xué)活性研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)選取小刺猴頭菌液體深層發(fā)酵浸膏為實(shí)驗(yàn)原料，經(jīng)熱水提取，乙醇沉淀得到小刺猴頭菌大分子糖組分(HFP)及小分子糖組分(HFA)，并進(jìn)行了抗腫瘤、升白、抗氧化及抑菌等藥理學(xué)活性的初步研究，為更全面、更深入地認(rèn)識(shí)和合理開(kāi)發(fā)小刺猴頭菌這一我省特色珍稀藥用真菌資源奠定基礎(chǔ)。 方法： 1.體外抗腫瘤試驗(yàn)：采用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法，通過(guò)MTT法觀察不同濃度的HFP和HFA對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC7721、人肺腺癌細(xì)胞SPC-a-1

2、、人胃癌細(xì)胞SGC7901等三種腫瘤細(xì)胞株增殖活性的影響，以分析HFP和HFA的抗腫瘤活性。 2.體內(nèi)抗腫瘤試驗(yàn)：通過(guò)建立小鼠移植性S180實(shí)體瘤模型，觀察HFP的抑瘤率以及對(duì)體重變化情況、脾系數(shù)和胸腺系數(shù)的影響。 3.HFP和HFA的抗氧化活性的研究：采用鐵氰化鉀-三氯乙酸法測(cè)定總還原力，鄰苯三酚法測(cè)定超氧陰離子自由基清除率，F(xiàn)e2+/H2O2法測(cè)定羥基自由基清除率。觀察HFP和HFA的總還原能力、清除超氧陰離子自由基

3、和羥基自由基的能力。 4.通過(guò)建立小鼠白細(xì)胞減少模型，觀察HFP對(duì)由CTX所致白細(xì)胞減少的小鼠的外周血白細(xì)胞數(shù)、骨髓有核細(xì)胞數(shù)以及小鼠脾系數(shù)和胸腺系數(shù)的影響。 5.通過(guò)對(duì)腹瀉小鼠致病菌的分離，觀察HFP對(duì)體外生長(zhǎng)的腸道菌生長(zhǎng)活性的影響。 結(jié)果： 1.體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)：HFP和HFA對(duì)體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞SMMC7721、人肺腺癌細(xì)胞SPC-a-1和人胃癌細(xì)胞SGC7901均表現(xiàn)出一定的抗腫瘤活性，但其抑制活

4、性受細(xì)胞種類、給藥劑量、作用時(shí)間等因素影響。二者對(duì)人肺腺癌細(xì)胞SPC-a-1的最大抑制率高于人胃癌細(xì)胞SGC7901和人肝癌細(xì)胞SMMC7721；對(duì)于同一種腫瘤細(xì)胞；高給藥劑量的抑瘤作用優(yōu)于低給藥劑量；長(zhǎng)時(shí)間給藥略優(yōu)于短時(shí)間給藥。 2.體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)：HFP可抑制小鼠體內(nèi)S180實(shí)體瘤的生長(zhǎng)，且預(yù)防組的抑瘤率高于治療組，高劑量組的抑瘤效果好于低劑量組。并且HFP組的脾系數(shù)和胸腺系數(shù)明顯高于CTX組。 3.抗氧化實(shí)驗(yàn)：HF

5、P和HFA均有一定的體外抗氧化活性，且相同濃度下，HFP的抗氧化作用優(yōu)于HFA。 4.HFP對(duì)CTX所致的白細(xì)胞減少有拮抗作用，同時(shí)可緩解CTX造成的骨髓有核細(xì)胞數(shù)下降，及脾和胸腺受到的抑制。但HFP單獨(dú)使用的效果不如多種不同來(lái)源的多糖(強(qiáng)力康顆粒)共同作用。 5.比濁法的結(jié)果證實(shí)：HFP可抑制大腸桿菌體外生長(zhǎng)，進(jìn)一步對(duì)其MIC的測(cè)定結(jié)果為40mg/ml。 以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：小刺猴頭菌液體深層發(fā)酵浸膏具有廣泛的藥