中鏈脂肪酸甘油三酯作為免疫佐劑的免疫效果的研究和應(yīng)用.pdf

1、由于疫苗研制日益變得復(fù)雜，同樣對(duì)佐劑也提出了更高的要求，佐劑在生產(chǎn)制造技術(shù)上的改進(jìn)創(chuàng)新，如延緩抗原釋放速度，能延長(zhǎng)疫苗的免疫有效期，使疫苗(人用與獸用)更有效更安全，這是全球各大疫苗廠商進(jìn)行研究和開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)領(lǐng)域。因此，探討研究不但能夠發(fā)揮其增強(qiáng)免疫作用的功效，又可使其具有運(yùn)載抗原，促進(jìn)抗原活性提高的佐劑對(duì)于新型佐劑的研究進(jìn)展意義重大。
　　本論文以尋找具有高效、速效、低毒、無(wú)不良反應(yīng)的新型免疫佐劑為主要目標(biāo)，以中鏈脂肪酸甘油三酯(

2、MCT)作為佐劑進(jìn)行初步研究為切入點(diǎn)，通過(guò)前期MCT對(duì)新城疫、傳染性支氣管炎和禽流感的抗體變化規(guī)律、T淋巴細(xì)胞增殖的變化、對(duì)淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-2，IL-6，IFN-γ的影響、免疫器官的變化以及對(duì)雞的生長(zhǎng)性能的影響的探討，并與常規(guī)白油佐劑進(jìn)行比較。然后較為系統(tǒng)的研究了MCT作為佐劑制備的新城疫、傳染性支氣管炎和禽流感(ND-IB-AI)三聯(lián)苗的安全性、毒理學(xué)和免疫效力等，最后初步研究了MCT中加入不同的免疫增效劑的免疫效果，具體研

3、究?jī)?nèi)容包括以下幾個(gè)方面：
　　1、MCT作為佐劑對(duì)雞新城疫、雞傳染性支氣管炎、雞禽流感的免疫效果的初步研究。為研究以MCT作為新型佐劑制備的新城疫、雞傳染性支氣管炎和流感滅活疫苗在雞體內(nèi)的抗體效價(jià)以及對(duì)機(jī)體的免疫作用，擬免疫試驗(yàn)雞后，分別采用微量血凝抑制法檢測(cè)試驗(yàn)雞免疫不同疫苗后機(jī)體的抗體效價(jià)，MTT法檢測(cè)外周血 T淋巴細(xì)胞的動(dòng)態(tài)增殖變化，雙抗夾心ELISA法檢測(cè)對(duì)淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-2，IL-6，IFN-γ的影響，并通過(guò)計(jì)

4、算料肉比檢測(cè)對(duì)雞的生長(zhǎng)性能的影響。
　　2、MCT為佐劑制備的ND-IB-AI三聯(lián)苗的安全性和毒理學(xué)研究。分別為三聯(lián)苗對(duì)最小使用日齡靶動(dòng)物、各種接種途徑的一次單劑量接種的安全性試驗(yàn)；三聯(lián)苗對(duì)靶動(dòng)物非使用日齡的安全性試驗(yàn)；三聯(lián)苗對(duì)靶動(dòng)物單劑量接種、單劑量重復(fù)接種、一次超劑量接種的安全性試驗(yàn)以及三聯(lián)苗對(duì)雞的免疫學(xué)影響及對(duì)雞的急性毒性試驗(yàn)。
　　3、MCT作為佐劑制備的ND-IB-AI三聯(lián)苗的免疫效力的研究。包括三聯(lián)苗免疫期試驗(yàn)；

5、三聯(lián)苗不同免疫途徑接種對(duì)雞的效力試驗(yàn)研究；三聯(lián)苗最小免疫劑量試驗(yàn)；三聯(lián)苗血清學(xué)效力檢驗(yàn)與靶動(dòng)物免疫攻毒保護(hù)結(jié)果相關(guān)性研究；三聯(lián)苗抗體消長(zhǎng)規(guī)律的研究；三聯(lián)苗免疫種雞的子代母源抗體測(cè)定及攻毒保護(hù)試驗(yàn)。
　　4、MCT作為佐劑分別加入魚(yú)肝油萜和馬尾藻多糖為增效劑的免疫作用的研究。試驗(yàn)擬分別用加入魚(yú)肝油萜和馬尾藻多糖的佐劑進(jìn)行比較試驗(yàn)，對(duì)試驗(yàn)雞分別免疫新城疫和流感(H5N1和H911)滅活疫苗后，分別采用微量血凝抑制法檢測(cè)試驗(yàn)雞免疫不同疫

6、苗后機(jī)體的抗體效價(jià)，MTT法檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞的動(dòng)態(tài)增殖變化，雙抗夾心ELISA法檢測(cè)對(duì)淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子 IL-2，IL-6，IFN-γ的影響，并通過(guò)計(jì)算料肉比檢測(cè)對(duì)雞的生長(zhǎng)性能的影響。
　　本論文的研究將MCT乳液體系應(yīng)用于疫苗的佐劑系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了疫苗免疫力產(chǎn)生迅速，免疫效力持久的理想目的，同時(shí)也可以天然油脂代替疫苗中礦物油，降低疫苗的毒副作用，改善肉質(zhì)，可實(shí)際應(yīng)用于蛋雞和肉雞的養(yǎng)殖中，從而取得良好經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。為MC