下調(diào)PKM2通過(guò)激活A(yù)MPK依賴的自噬促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞存活.pdf

1、目的：
　　研究丙酮酸激酶M2在胰腺癌的發(fā)生發(fā)展中的作用。該研究有利于進(jìn)一步理解胰腺癌發(fā)展機(jī)制和為改善胰腺癌的治療提供參考。
　　方法：
　　選取了華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬武漢協(xié)和醫(yī)院胰腺外科2010年9月到2012年11月間手術(shù)切除的24例胰腺癌患者的胰腺癌組織標(biāo)本及相對(duì)應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本，通過(guò)PCR和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)確定PKM2在腫瘤組織和癌旁組織的表達(dá)差異。進(jìn)一步在胰腺癌細(xì)胞系內(nèi)調(diào)控PKM2以研究其在細(xì)胞中的調(diào)控作用

2、，考慮到胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的低糖微環(huán)境，繼續(xù)觀察在低糖處理的情況下PKM2對(duì)胰腺癌細(xì)胞的影響。
　　結(jié)果：
　　在這24例標(biāo)本中，發(fā)現(xiàn)PKM2在腫瘤組織中是明顯高表達(dá)的并且差異據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01）。隨后在胰腺癌細(xì)胞系PANC-1和BXPC-3中轉(zhuǎn)染PKM2-RNAi，進(jìn)而觀察PKM2對(duì)于胰腺癌細(xì)胞系的影響，和預(yù)測(cè)的結(jié)果相反，低表達(dá)水平的PKM2并沒(méi)有抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，反而對(duì)胰腺癌細(xì)胞有輕微的促進(jìn)生長(zhǎng)作用，并且發(fā)現(xiàn)在低

3、葡萄糖環(huán)境處理的情況下低水平的PKM2促進(jìn)存活和增殖作用更為明顯，并且伴隨G2-M期的細(xì)胞比例增多以及自噬水平增強(qiáng)。增強(qiáng)的自噬水平是胰腺癌細(xì)胞在低糖環(huán)境下存活的必需。隨后發(fā)現(xiàn)下調(diào)PKM2伴隨著腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1（AMPKα1）上調(diào)，并且PKM2-RNAi和AMPKα1-RNAi的共轉(zhuǎn)染明顯抑制了自噬和胰腺癌細(xì)胞的存活和增殖。
　　結(jié)論：
　　雖然發(fā)現(xiàn)PKM2在胰腺癌中是高表達(dá)的，但是在體外實(shí)驗(yàn)中它并不是一個(gè)好的治療靶